1. 引言
石榴皮是石榴科植物石榴Punica granatum L.的干燥果皮。秋季果实成熟后收集果皮晒干而得。石榴皮具有涩肠止泻、抗病毒、抗氧化、抑菌、驱虫等功能 [1] 。临床上石榴果皮煎剂可治疗痢疾和腹泻，浸剂可治疗结肠炎和胃痛等。石榴皮是《中国药典》收载的品种 [2] 。石榴皮中含有黄酮类、鞣质类、有机酸类，多酚类等多种化合物 [3] [4] ，没食子酸是其主要有效成分 [5] 。本文采用紫外分光光度法测定了不同品种石榴皮中没食子酸含量。
2. 材料与方法
1) 石榴样品购自云南省蒙自市当地农贸市场。
2) 仪器和试剂
仪器为紫外-可见分光光度计(TU1810，北京普析)，超声提取器(SK3200H，上海仪器制造厂)，电热鼓风干燥器(101-1AB型，天津市泰斯特仪器有限公司)；没食子酸对照品(ID：3UF2-XRLZ，中国食品药品检验研究院)，其他试剂为分析纯。
3) 供试品制备：将新鲜石榴的皮剥下，洗干净后剪小，置于电热鼓风干燥箱中70度加热干燥12小时，粉碎后过100目筛，备用。
4) 对照品溶液制备及最大吸收波长选择：精确称量7.7 mg的没食子酸对照品于100 mL的容量瓶中，用无水乙醇溶解后定容，得到浓度为0.77 mg/mL的对照品溶液。适当稀释后于200~400 nm波长进行扫描，得到最大吸收波长为273 nm。
3. 结果与分析
3.1. 提取条件研究
3.1.1. 乙醇体积分数对提取率的影响
精密称取石榴皮粉末三份各1 g，精密称定后放入100 mL容量瓶中，将提取的料液比(g/mL)固定为1:20，超声时间固定为30 min，设定不同的溶剂：40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇，加入85 mL提取溶剂，提取完成后分别用不同溶剂定容，精密量取4 mL，用溶剂定容到50 ml，再精密量取5 mL，用溶剂定容到25 ml，于273 ml波长出测定吸收度，分别为0.503，0.664，0.441，结果见图1。
3.1.2. 料液比对提取率的影响
固定60%乙醇浓度、提取时间30 min，考察料液比为：1:15，1:20，1:25对提取率的影响，提取及处理过程同2.1.1，测定的吸收度分别为0.482，0.635，0.605，结果见图2。
3.1.3. 超声时间对提取率的影响
固定提取溶剂为60%的乙醇溶液，料液比为1:20，通过改变超声的提取时间来考察时间对提取率的影响，时间定为：30 min、40 min、50 min，提取及处理过程同2.1.1，测定的吸收度分别为0.436，0.540，0.387，结果见图3。
3.2. 方法学讨论
3.2.1. 线性关系考察
取1.4配制的0.77 mg/mL的对照品溶液，精密量取10.0 ml，于50 mL容量瓶中用无水乙醇定容， 得到15.4 μg/mL的标准液。分别精密吸取1.5、3.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL于10 mL容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，在273 nm波长处测定吸收度(A)，以浓度(μg/mL)为横坐标(X)，吸收度为纵坐标(Y)，得
Figure 1. The influence of ethanol volume fraction on the extraction yield
图1. 乙醇体积分数对提取率的影响
Figure 2. The effect of feed liquid ratio on extraction rate
图2. 料液比对提取率的影响
Figure 3. The effect of ultrasonic time on extraction rate
图3. 超声时间对提取率的影响
到线性回归方程：Y = 0.0503X + 0.0227，r = 0.9902，n = 6，表明没食子酸在2.31~15.40 μg/mL浓度范围内有良好的线性关系。
3.2.2. 精密度试验
取同一对照品溶液，适当稀释后，于273 nm波长处测定吸收度，平行测定5份，由测得的吸收度计算RSD为1.73%，表明测定的精密度良好。
3.2.3. 重复性试验
取同一批样品5份，精密称定，用60%的乙醇，按1:20的料液比超声提取30 min，过滤取滤液适当稀释后在273 nm波长处分别测定吸收度，由测得的吸收度计算RSD = 3.56%，说明重复性良好。
3.2.4. 稳定性试验
取2.2.3得到的同一个供试品溶液，室温放置，分别于0 h，1 h，2 h，3 h，4 h，5 h，进样测定吸收度值，计算得到其RSD = 2.65%。说明样品在5 h内稳定性良好。
3.2.5. 加标回收率试验
精密称取已经测定含量的同一个供试品3份，分别加入一定量的没食子酸对照品溶液，按供试品制备和测定方法操作。计算其平均加标回收率为94.2%，RSD为3.40%。
3.3. 样品测定
取不同品种的石榴皮样品各约100 mg，精密称定，用60%的乙醇85 mL，按1:20的料液比超声提取30 min后定容，过滤后精密量取滤液4 mL用60%乙醇定容到25 mL，在273 nm波长处分别测定吸收度.其含量测定结果为(干重):甜绿籽6.04%；甜光颜5，91；酸绿子7.35%；酸沙子10.08%.
4. 讨论
1) 本文比较了超声提取和热回流提取，其提取率差别很小，而超声提取简便快速，所以选择用超声提取处理样品。其他提取方法还有水提醇提 [6] [7] 等等。
2) 本文所测定四个品种的石榴皮中没食子酸含量，酸的品种比甜的品种含量高，该方法简便，快速，测定的准确度，精密度和线性关系都令人满意，可以用于石榴中没食子酸的测定。文献报道的石榴皮中没食子酸含量差别很大 [7] [8] [9] ，可能与石榴的品种有关，也可能和测定方法有一定关系，一般UV测定的比HPLC测定的含量要高。
基金项目
云南省教育厅科学研究基金项目资助(2016ZDX225)，云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项资金项目【2017FE468(-186)】。
参考文献
NOTES
*通讯作者。