1. 引言
我国大豆种质资源十分丰富，有待开发利用的优异基因较多。大豆常规育种的亲本来源较为狭窄，品种间的遗传多样性贫乏，突破大豆产量水平和抵御突发性逆境危害有一定困难。实现大豆优质、高产育种，利用大豆核不育材料构建种质基因库基础群体并进行轮回选择，是选育大豆新品种的一种有效方法。
轮回选择技术作为种质创新的一种方法在大豆育种中的应用较为广泛 [1] 。国内外学者研究证明轮回选择对大豆熟期、蛋白质、脂肪、抗病有效 [2] 。宋启建等研究人员构建了我国第一个大豆ms1雄性不育轮回群体 [3] 。邓莹莹等 [4] 研究结果表明，轮回选择后大豆基因的个别位点频率发生了变化。国内研究人员张孟臣、杨春燕等对大豆轮回群体供体亲本的混合比例进行研究，结果表明：随着供体亲本与ms1原始群体比例增大，供体亲本的导入率不断提高。在等面积混合比例为1:1时，可获得较多的异交种子。当混合比例为5:1时导入率接近50%。群体中不育株接受外来花粉的距离研究结果表明：不育株主要接受近距离可育株的花粉，导入亲本材料与不育群种子均匀混合种植可提高异交结实率。张孟臣等研究人员构建了河北夏播生态类型的ms1大豆种质基因库基础群体，大豆ms1高蛋白亚群体、高油亚群体等。并通过轮回群体选择技术，培育了高油大豆新品种“冀豆19” [5] ，高蛋白大豆品种“冀豆20”。
本研究主要是用大豆ms1雄性核不育雌性可育基因，通过自然界昆虫传粉、授粉，使封闭式杂交变为开放式杂交，以互交、回交、轮回选择为基础，将尽可能多的优良基因聚集到一个开放式的基因库中，构建宁夏春大豆雄性核不育种质基因库基础群体，并根据不同农业生态区域农业生产对大豆优良品种的需求，不断挖掘这些资源中的有利基因，选育优质、高产、抗逆、广适应性的春大豆新品种，为农业生产服务。
2. 材料来源
2009年从河北农科院粮油研究所引进大豆ms1雄性核不育材料。亲本受体材料72份，来源于中国农科院15份、宁夏13份、河北16份、山西8份、山东12份、辽宁4份、吉林4份、黑龙江1份、甘肃1份。
3. 试验方法
试验研究在宁夏农林科学院农作物研究所试验基地进行(E：106˚12'36 N：38˚13'1)。本区域位于宁夏中北部平原地区，地势平坦，土壤为黄河灌淤土，土层深厚，生产性能良好。温带干旱半荒漠气候，干旱少雨，日照充足，热量资源丰富，年平均气温8˚C~9˚C，≥10˚C的活动积温3200˚C~3400˚C。昼夜温差大，一般为13˚C左右，有利于大豆干物质的积累，年日照时数3000 h以上，无霜期160 d，年降水量200 mm左右。试验材料等行距种植，行距50 cm，株距13 cm。试验播种日期、施肥量及田间管理与一般生产大田相同。
1) 收集足够多的不育株籽粒和优异亲本受体材料；
2) 不育株籽粒和亲本受体材料1:5混合种植进行杂交；
3) 种植不育株籽粒使群体内基因重组和分离，按照育种目标选择优良单株。
4. 研究结果
4.1. 构建核不育种质基因库基础群体
利用大豆ms1雄性核不育基因丰富了群体的遗传多样性。2016年构建了宁夏春大豆种质基因库杂交群体，当年摘荚收获不育株籽粒3000 g，11月份在海南加代繁殖不育株籽粒并收获可育株粒。2017年种植南繁回来的可育株粒，种植面积1200 m2，选择优良单株292株，摘荚收获不育株籽粒7000 g，11月份继续在海南加代繁殖不育株籽粒(4000 g)并收获可育株籽粒。2018年继续再次导入优选的亲本受体基因。经过2~3轮的基因导入完成宁夏春大豆种质基因库基础群体构建工作。宁夏春大豆种质基因库基础群体构建技术路线见图1。
4.2. 轮回选择育种技术
大豆ms1轮回群体选择育种是在大豆轮回群体优化的前提下进行的大豆新种质、新品系的选育 [5] 。笔者曾对选择的早熟、中熟、晚熟3个群体的产量性状进行遗传变异分析。结果表明，各性状均有较大的遗传变异。晚熟群体的农艺性状尤其对株高、底荚高、主茎节数、分枝数、有效分枝数单株荚数性状的变异系数明显高于早熟亚群体。当然除了按照成熟期构建群体外，还可以进一步构建大豆高蛋白、高脂肪亚群体，有关这方面的论述国内学者多有论述。
ms1核不育大豆轮回群体选择主要是通过选择、杂交、再选择、再杂交以增加所需优良基因频率的育种体系。其选择技术主要包含三个方面：一是从原始群体中产生后代；二是从后代中选择优良个体；三是当选个体互交后形成下一个轮选群体。通过不断地选择、杂交、重组，使群体中优异基因的频率不断提高。群体改良过程中，一方面可以不断向群体输入新种质；另一方面，在任一轮群体中均可以选择优良单株，结合育种程序创制优良新品种或种质资源。大豆核不育轮回群体选择育种技术是群体改良技术与选择技术的结合。一般经过2轮以上选择使群体得到改良；对选择的优良单株进行鉴定，表现突出的优良品系进入产量试验。鉴定步骤一般为1) 株行 → 2) 株系 → 3) 产量鉴定 → 4) 品种比较试验。
4.3. 种质创新及进展
大豆ms1轮回群体选择育种不同于常规杂交育种，它是在大豆ms1轮回群体优化的前提下进行新种质、新品系的选育。宁夏春大豆ms1雄性核不育轮回群体选择的育种目标是选择适宜宁夏春播的优质高产大豆品种，或生产需求的新种质材料，选育创新优异高产株型材料。株高100 cm左右，直立、抗倒伏、抗病、适应性强、籽粒外观商品性好、品质优良、产量性状突出、目标产量250 kg/666.7m2以上，生育期135 d左右的中晚熟春大豆品种或高蛋白质、高油专用品种。目前初步构建了宁夏春大豆核不育种质
备注：不育材料与混合受体亲本1:5种植。收获的不育株粒南繁收获可育株种子。
Figure 1. Ningxia based group spring soybean germplasm gene bank building technical route
图1. 宁夏春大豆种质基因库基础群体构建技术路线示意
基因库基础群体中晚熟亚群，2015年轮回群体选择育种的大豆新品种(系)产量鉴定试验结果表明：比对照增产5%以上的新品系有5个。2016年种植杂交群100 m2，收获不育株粒2200 g，海南南繁加代1000 g，重组群种植600 m2，稳定群种植优良单株281份，株系67份，产量鉴定新品系13份，有4个新品系比对照增产，增幅3%~16%。2017年种植杂交群600 m2，重组群2000 m2，稳定群种植优良单株255份，株系53份，新品系产量比较试验参试材料11份，比对照增产的有2个品系。13LD-222比对照平均增产31.17 kg/666.7 m2，增产9%，13LD-219比对照平均增产12.65 kg/666.7 m2，增产4%。
5. 讨论
1) 春大豆ms1大豆雄性核种质基因库基础群体的构建，为加快宁夏春大豆新品种(系)的选育奠定了丰富的种质基础。
2) 大豆ms1核不育轮回选择育种，收获的不育株籽粒有限，杂交系谱不详。
3) 轮回群体选择育种技术与常规杂交育种技术相比：a) 可以获得较多的亲本组合类型；b) 大豆ms1雄性核不育基因的开放性，使封闭式杂交变为开放式杂交；c) 省去了人工杂交的烦琐程序；d) 实现了多基因重组，当年就可以获得遗传基础比较广泛的分离群体；e) 选择优异单株的空间大。
基金项目
国家大豆产业技术体系银川综合试验站支撑项目(CARS-04)。
NOTES
*通讯作者。