1. 引言
犬冠状病毒(Canine coronavirus, CCV)、犬副流感病毒(Canine parainfluenza virus, CPIV)、犬传染性肝炎病毒(Canine infectious hepatitis virus, ICHV)和犬传染性喉气管炎病毒(Canine infectious laryngotracheitis virus, ICLV)是引起犬类疾病的主要病原体。CCV可能造成病犬,特别是发病幼犬的死亡;犬副流感属于犬类的常见疾病之一,犬感染CPIV后,常引起一系列的继发感染,严重时可以导致犬死亡 [1] ;犬传染性肝炎是一种高度接触性、急性、败血性传染病,病原为犬腺病毒I型(Canine adenovirus type-1, CAV-1)。该病一旦发病,年龄在1岁以下的幼犬死亡率较高,且临床上往往会与犬瘟热发生混合感染,危害巨大;犬传染性喉气管炎是由犬腺病毒II型(Canine adenovirus type-2, CAV-2)引起的,是一种犬易感的慢性呼吸道传染病,常引起喉炎、气管、支气管炎等症状。上述的4种病毒,给我国养犬行业带来了严重经济利益损失。
2. 病原学
CCV属于冠状病毒科(Coronaviridae)甲型冠状病毒属(Alphacoronavirus),其核酸型为单股RNA。该病毒长约80~120 nm,宽约75~80 nm,其形态呈圆形或椭圆形,有表面有花瓣状纤突的囊膜,有机溶剂、反复冻融等操作会造成其突起脱落,丧失感染性,失去其电镜下的形态特征,变得难以观察。CCV对酸和胰酶的抵抗力较强,这使得CCV能在pH = 3.0,20℃~22℃的酸性环境中存活环境中存活 [2]。CCV通过胞饮作用进入易感细胞,在细胞浆内复制,通过空泡与细胞膜融合或细胞崩解释放。
CPIV为单股负链RNA病毒,形态多样,常见为球形,该病毒于细胞浆中合成,以出芽的方式释放。于1972年正式划归副黏病毒科(paramyxoviridae)副黏病毒属(paramyxovirus)。CPIV的囊膜是由细胞外膜的脂类衍生而成,脂蛋白包膜脆弱,容易被破坏。
CAV属于腺病毒科(Adenoviridae),哺乳动物腺病毒属(Mastadenovirus)。CAV拥有两种不同的血清型,即CAV-1和CAV-2,分别引起犬传染性犬肝炎和犬传染性喉气管炎。该病毒无囊膜,直径约70~90 nm,其纤突顶端有能吸附细胞和凝集红细胞的作用的球状物 [3]。CAV-1和CAV-2的抗原性接近的并且具有约75%的遗传同一性。目前无论是CAV-1还是CAV-2的疫苗制剂都是基于CAV-2,因为两者都能够交叉保护 [4]。
3. 临床症状
犬冠状病毒病传染迅速,数天即可扩散至全群,症状轻重不一,潜伏期为1~5天。但一般情况下症状相比较犬细小病毒感染较轻。病犬感染CCV会出现呕吐和腹泻的症状,病情严重时会出现嗜睡、精神萎靡、食欲不振或废绝,多数情况下体温不变。病犬会排出呈换绿色或者橘红色的粥样或水样粪便,粪便会带有黏液或少量血液,有腥臭味 [5]。病程一般在7~10天,发病后的1~2天内病犬,特别是幼犬易死亡,但成年犬很少死亡。
单纯的CPIV感染与感冒临床症状相似,表现发热、咳嗽、流涕等。但CPIV感染比感冒传播更迅速,爆发更突然,病犬会出现精神沉郁,干咳,鼻腔分泌物增多,呈浆液性或黏液性。研究表明,CPIV也能引起犬的急性脑髓炎和脑内积水,表现为后躯麻癖和运动失调等症状 [6]。在大多数情况下,呼吸道疾病无临床症状在或症状非常轻微,有时在病毒感染后的7至9天左右,会出现严重的流鼻涕、轻度咽炎和扁桃体炎并持续3~5天,不发烧或体温高于正常1℃~2℃持续数天。实验室检测中CPIV感染的组织学病变包括卡他性鼻炎,粘膜和粘膜下层混合炎性细胞浸润,以及气管支气管炎和细支气管炎,伴有纤毛细胞损失,上皮增生和杯状细胞突出。在组织学检测中检测变化在感染后约6~12天内最严重。
犬传染性肝炎该病的潜伏期为6~9天,病犬体温曲线呈马鞍型变化,体温在常温到40℃~41℃之间变化。1岁以下的幼犬通常会出现急性发病,且容易死亡。在感染CAV-1后,病犬的临床症状为食欲不振,精神萎靡,黏膜苍白或者轻度黄染,齿根出血,如能耐过48小时,幼犬多能康复。病犬的角膜往往呈现混浊,从而形成白色或者蓝白色的角膜翳,数天后消失,这种症状也被称为“肝炎性蓝眼”。
犬传染性喉气管炎是的潜伏期在5~6天之间,一般常见于4月龄以下的小犬 [7]。感染CAV-2后,病犬一般表现为,持续39.5℃的高热,并伴有咳嗽,流浆液性或者粘液性的鼻液,喉气管发炎,扁桃体炎症,肺炎等。
4. 病理变化
感染CCV后,主要的病变是剖检可见的不同程度的胃肠炎变化。该病典型的特征是肠黏膜脱落。感染犬的尸体脱水严重,腹部增大,腹壁变得松弛,胃和肠管发生扩张,肠壁变薄,肠管内有血样液体,胃肠黏膜处充血、出血,胃内有黏液,病犬易发生肠套叠,此外,犬的肠系淋巴结和胆囊也会变得肿大。对病犬进行组织学检查则主要可见小肠绒毛变短和融合,其隐窝变深,绒毛长度与隐窝深度的比值变化明显 [8]。带有CCV的粪便是该病主要的传染源,通过污染笼具和饲料饮水等方式经消化道感染。
CPIV主要由呼吸道进行传染,但对神经系统也有较强的感染能力,病情严重时可能导致犬的死亡。其病理变化过程为:首先是鼻内感染,但因为有着鼻粘膜的保护所以鼻腔内少有炎症发生,后沿着呼吸道,使感染动物气管中出现炎症及变性损伤。由于CPIV不能在巨噬细胞中进行增殖,因此CPIV的感染被限制在了上呼吸道,阻止了CPIV感染其他器官。在犬感染CPIV的8~10天后,大量的CPIV会从气管、肺部分泌物中分泌出来,并通过喷嚏或者咳嗽等方式以飞沫的方式,排出体外并进行传播,致使吸入带毒飞沫会的易感动物感染发病。
自然感染传染性肝炎的犬大部分为消化道感染,其主要病理变化是病毒对肝脏和血管内皮细胞的损伤。腹腔中常有血样腹水,肝脏肿大,边缘钝化,呈花斑状。胆囊水肿特别明显;肠胃道粘膜出血,肾脏出血,淋巴结肿大出血 [9]。病犬死前有时出现慢性肝功能衰竭,可见肝脏变小硬化。急性发热期的疾病,病毒能入侵眼引起角膜水肿与虹膜睫状体炎。
犬传染性喉气管炎变化一般局限在呼吸道,主要表现为肺膨胀不全,充血,并常带有不同程度的肝变、支气管淋巴结充血。组织学检查可见不同程度的肺炎病变,支气管黏膜上皮、肺泡上皮、鼻甲上皮可见有核内包涵体。
与CAV-1感染相同,病犬在感染CAV-2的初期,血液中带毒,之后则存在于所有的分泌物和排泄物中,从而污染环境,感染易感动物。
5. 疾病诊断
犬冠状病毒病在临床上,可先通过问诊,听犬主诉说病犬的病史,之后可通过观察犬的症状,如是否呕吐和腹泻,精神不振,嗜睡,食欲减少或废绝等。
本病在临床症状、病理变化上,与犬细小病毒感染肠胃道出现的症状相似,以此应使用电镜观察、病毒分离鉴定、荧光抗体或血清学试验等实验室诊断方法对病犬进行检测。近来一般常用胶体金试纸条,同时测细小病毒和冠状病毒,此法简单快捷方便准确率高。
由于犬的很多呼吸道疾病在临床上表现较为相似,所以CPIV的临床诊断较为困难,最明确的活体诊断方法是检测鼻腔分泌物。在实验室诊断中,病毒的分离鉴定、PT-PCR检测、免疫荧光检测、补体结合实验等诊断方法较为常用。但研究发现,在一部分正常犬和某些方法接种过CPIV病毒疫苗的正常犬中也能检测出CPIV [10]。
犬传染性肝炎病毒的诊断除了可通过观察症状来确认,还可通过病理解剖进行进一步诊断分析。临床剖检主要特征有的患病死犬会出现肝脏、全身淋巴结肿胀、胃肠道有出血、大量浆液或血样液体积留在腹腔等病理变化 [11]。
犬传染性喉气管炎患病死犬的临床症状主要集中在呼吸道,如肺充血膨大、支气管淋巴结出血等,除此之外还会出现扁桃体肿大出血等病理变化。但是在临床诊断上病与犬钩端螺旋体、犬细小病毒感染的症状相似,造成临床诊断难以区分,因此需要用ELISA、PCR和血凝试验等实验室诊断的方法来进行进一步的确诊。
6. 疾病预防
为预防CCV、CPIV、CAV-1和CAV-2的感染,应加强环境卫生的消毒工作,加强饲养管理,同时对健康犬进行免疫。
由于CCV发病的病犬的粪便中携带有大量的可传染的病毒,因此保持良好的卫生环境和及时隔离病犬十分的重要。出现过CCV感染的犬舍可外用0.1%的甲醛消毒 [12]。
CPIV主要通过呼吸道方式传播,所以对于发病犬,应减少寒冷等因素对呼吸道的刺激,立即进行隔离,同时提供舒适的环境温度。
对于CAV,感染的病犬在康复期时仍可向外排毒,所以应隔离半年以上。
7. 讨论
CCV于1971年首次发现,至1995年首次在中国发现,其引起的病是一种全球性的流行病,所有品种和年龄段的犬都易受其感染。CCV与CDV或其它肠道病原体混合感染时,对幼犬来说可能是致命的。该病发病快、爆发力强,所有犬都易感,因此此病一旦爆发对养犬行业造成的影响非常大。
犬类在感染CPIV后,易引发一系列的继发性感染,严重时会造成犬的死亡,对犬生命健康和相关产业的威胁巨大。CPIV因其感染方式和宿主广泛而先后成为流感病毒、狂犬病病毒等重要病原的重组疫苗载体。
CAV-1和CAV-2的抗原性接近并且具有约75%的遗传同一性,可产生交叉保护。CAV-1发病的死亡率高,特别是对小于1岁的幼犬,且临床上往往会与犬瘟热发生混合感染,对养犬行业的危害巨大。CAV-2是一种慢性的呼吸道传染病。CAV-2免疫能够有效地针对CAV-1,而且在我国CAV的感染相当普遍,任何年龄、性别和品种的犬都易感,因此CAV-2的研究意义重大。
以上四种病毒应当给予该病足够的重视,实验室方面应加强这些病毒的研究。养犬行业应加强饲养管理,定期注射疫苗,以做到防患于未然。
基金项目
国家重点研发计划资助(2017YFD0501600);山东省现代农业特种经济动物产业创新团队项目(SDAIT-21-13)。
NOTES
*通讯作者。