1. 引言
祛湿止痒方为我院皮肤科传统经方,方中有马齿苋、苦参、地榆、百部按照一定比例组成。方中马齿苋为君药,以苦参为臣药,辅以百部、地榆。其具有清热凉血,祛湿止痒的功效,尤其对血热引起的皮肤瘙痒、红斑、脱屑等具有较好的治疗效果。本品作为一种皮肤科外治法中药洗剂,一直为我院皮肤科治疗皮肤病的良方,临床疗效较好,不良反应小,原方为汤剂,经皮肤科开具后有患者自行熬制后涂擦于患病处,但由于煎煮后使用较麻烦,且煎煮后的药液保存不当极易导致质量问题,出现霉变及质量不稳定情况,且患者使用不便。为进一步加强祛湿止痒质量控制,保证产品质量及临床应用,以更加方便患者使用和携带,经我院药事会研究,我院制剂室对祛湿止痒方进行了工艺与质量标准研究,预制成便于患者携带的外用洗剂。
薄层色谱技术方法可靠,能较准确地鉴别出中药饮片,特别是中成药中中药材。2020版《中药药典》记载的中成药中绝大多数均采用了薄层色谱鉴别技术。本试验采用薄层色谱鉴别(TLC)对祛湿止痒方中主要药材进行鉴别,以更好控制其质量,保证患者用药安全。
2. 仪器与试药
2.1. 仪器
梅特勒ME55十万分之一分析天平(瑞士梅特勒公司);JK-DY300型超声波清洗器(输出功率300 W,工作频率40 kHz;合肥金尼克机械制造有限公司);数显恒温水浴锅(上海市力辰邦西数显恒温水浴锅,功率800 KW);双层薄层展开缸。
2.2. 试药
本研究所用对照品:马齿苋、苦参、地榆、百部对照药材;对照药材:盐酸小檗碱、氧化苦参碱;分析纯:甲醇、甲酸、三氯甲烷、正丁醇、甲苯等,详见表1。
Table 1. Batch number of reference materials and reference medicinal materials
表1. 对照品及对照药材批号
3. 定性鉴别研究
3.1. 马齿苋薄层鉴别
硅胶板:高效硅胶G板,安徽良辰硅园材料有限公司,规格:100 × 100,批号:20190527;
普通硅胶G板,青岛海洋化工有限公司,规格:100 × 100,批号:20190916。
关于马齿苋薄层色谱鉴别,本研究采用2020版《中国药典》中马齿苋鉴别方法 [1]。具体方法详见表2。
Table 2. TLC identification methods of Portulaca oleracea
表2. 马齿苋薄层色谱鉴别方法
供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,见图1。
注:从左至右—,1马齿苋对照药材;2阴性对照;3~5祛湿止痒样品(批号:20200901、20200902、20200903)。
Figure 1. Identification of purslane in dehumidification and antipruritic lotion by TLC
图1. 祛湿止痒洗剂中马齿苋薄层色谱鉴别
3.2. 地榆鉴别
硅胶板:高效硅胶G板,安徽良辰硅园材料有限公司,规格:100 × 100,批号:20190527;
普通硅胶G板,青岛海洋化工,规格:100 × 100,批号:20190916。
关于地榆薄层色谱鉴别,本研究采用2020版《中国药典》中地榆鉴别方法 [2]。具体方法详见表3。
Table 3. TLC identification method of Sanguisorba officinalis
表3. 地榆薄层色谱鉴别方法
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,见图2。
注:从左至右—,1地榆对照药材;2阴性对照;3~5祛湿止痒样品(批号:20200901、20200902、20200903)。
Figure 2. TLC identification of Sanguisorba officinalis in dehumidification and antipruritic lotion
图2. 祛湿止痒洗剂中地榆薄层色谱鉴别
3.3. 苦参鉴别
硅胶板:2%氢氧化钠硅胶G板,青岛海洋化工,规格:100 × 100,批号:20190916。
关于地苦参薄层色谱鉴别,本研究采用2020版《中国药典》中地榆鉴别方法 [3]。具体方法详见表4。
Table 4. TLC identification method of Sophora flavescens
表4. 苦参薄层色谱鉴别方法
供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的橙色斑点 [4] [5],见图3。
注:从左至右—,1氧化苦参碱;2苦参对照药材;3不含苦参阴性样品;4~6祛湿止痒洗剂(批号20200901、20200902、20200903)。
Figure 3. TLC identification of Sophora flavescens in dehumidification and antipruritic lotion
图3. 祛湿止痒洗剂中苦参薄层色谱鉴别
4. 结果
通过研究发现,马齿苋、苦参、地榆进行薄层色谱鉴别方法可靠,实验中阴性均无干扰,方法简单,能够将四种药材鉴别出。
同时,本研究考察了不同厂家的薄层色谱硅胶板对祛湿止痒洗剂中马齿苋、苦参、地榆分别进行对比研究分析。通过研究发现,采用高效硅胶G板后马齿苋薄层色谱更清晰,而研究发现,普通硅胶G板能够较好的分离鉴别,故对于的鉴别我们采用普通硅胶G板进行,而对于地榆、百部均采用普通硅胶G板,而苦参采用2%氢氧化钠改性后的硅胶G板进行鉴别。
5. 讨论
本研究中采用2020版《中国药典》薄层色谱鉴别方法鉴别马齿苋、苦参、地榆,同时,参考知网中关于百部的薄层色谱鉴别法,对百部的薄层色谱进行鉴别。方法简单,结果准确,同时阴性对照无干扰,能够很好地对祛湿止痒主要成分进行鉴别。为保证制剂的稳定性及安全性提供保障。
薄层色谱技术在中药材及其制剂鉴别中应用较普遍,技术成熟。2020版新编中成药中基本都采用了薄层色谱鉴别技术,薄层色谱鉴别在鉴别中药颗粒剂中方法可靠。然而,由于用于薄层色谱鉴别的试剂毒性相对较大,如二甲苯、甲苯、氯仿,且薄层色谱在鉴别很多具有挥发油的中药中鉴别特点不明显,如鉴别颗粒剂中的苍术中苍术酮,往往在鉴别时候由于样品处理不当或者原药材提取时间过长等原因而没有斑点。使得目前中药薄层鉴别发展有限。而HPLC方法的不断更新与进步,在定性鉴别与定量分析中优势越来越明显,特别是HPLC更快,更低毒,鉴别范围广,一次进样可以同时鉴别出几种甚至数十种药材。然而目前,薄层色谱作为中药鉴别的一种方法,特别是在中药复方的鉴别上仍是一种重要方法。
基金项目
2021年度阜阳市卫生健康委科研课题青年项目中药制剂室精细化管理模式研究(FY2021-152)。
参考文献
NOTES
*通讯作者。