摘要: 目的：了解江西赣南地区SLCO1B1 & ApoE基因多态性的分布情况及其与治疗急性缺血性卒中疗效的相关性。方法：严格按照病例纳入和排除标准，连续募集2021年1月1日至2021年6月30日期间，在赣南医学院第一附属医院住院诊断为急性缺血性卒中的患者，常规按急性缺血性脑卒中诊治指南进行治疗，并给予SLCO1B1 & ApoE基因检测，同时监测其肝功能、血脂，记录肌痛情况。结果：SLCO1B1基因型包括*1a/*1a、*1a/*1b、*1b/*1b、*1a/*5、*1a/*15、*1b/*15、*5/*5、*5/*15、*15/*15，患者所占比例分别为23.08%、25.82%、19.52%、1.92%、8.24%、14.56%、1.92%、3.02%、1.92%。ApoE基因型包括E2/E2、E2/E3、E2/E4、E3/E3、E3/E4、E4/E4，患者所占比例为1.10%、4.40%、13.46%、60.16%、18.41%、2.47%。结论：SLCO1B1 & ApoE基因检测利于个体化他汀类药物治疗。
Abstract:
Objective: To investigate the distribution of SLCO1B1 & ApoE gene polymorphism and its correlation with the therapeutic effect of acute ischemic stroke in the Gannan area of Jiangxi Province. Methods: In strict accordance with the inclusion and exclusion criteria, patients diagnosed with acute ischemic stroke in our hospital from January 1, 2021, to June 30, 2021, were recruited continuously, and were given SLCO1B1 & ApoE gene tests. Meanwhile, their liver function and blood li-pid were monitored, and myalgia was recorded. Results: SLCO1B1 gene types including the *1a/*1a, *1a/*1b,*1b/*1b, *1a/*5, *1a/*15, *1b/*15, *5/*5, *5/*15, and *15/*15. The proportion of patients were 23.08%, 25.82%, 19.52%, 1.92%, 8.24%, 14.56%, 1.92%, 3.02%, , and 1.92%, respectively. ApoE geno types including E2/E2, E2/E3, E2/E4, E3/E3, E3/E4, and E4/E4, and the proportion of patients was 1.10%, 4.40%, 13.46%, 60.16%, 18.41%, and 2.47%. Conclusion: SLCO1B1 & ApoE gene detection is beneficial to individualized statin therapy.
1. 引言
随着人口老龄化及人们生活水平日益提高，高血压病、高血脂症、脑卒中、冠状动脉粥样硬化性心脏病等疾病的发病率逐年升高。众所周知，缺血性脑卒中、冠状动脉粥样硬化性心脏病，具有高发病率、高致残率、高死亡率、高复发率，严重危害人类的健康，给社会、家庭、个人带来严重的负担。而他汀类药物是缺血性脑卒中、冠状动脉粥样硬化性心脏病患者二级预防治疗的重要基石 [1]。他汀类药物是胆固醇合成限速酶–羟甲基戊二酰辅酶A (hydroxyl methyl glutaryl-coenzyme A, HMG-CoA)还原酶的抑制剂，主要通过竞争性抑制HMG-CoA还原酶的活性，抑制肝细胞内胆固醇的合成，增加肝细胞表面低密度脂蛋白胆固醇(LDL)受体的水平，加快血液中LDL的清除。但不同个体对他汀药物的反应性存在明显差异，医学研究表明，在降低低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的治疗中他汀类药物有10%~70%不等的个体差异，并且接受他汀治疗的患者中10%~15%有他汀不耐受性 [2]。个体的差异可能主要与他汀类药物代谢的酶、转运蛋白及药物靶受体等的基因多态性密切相关，尤其是与编码他汀类药物肝脏代谢关键转运蛋白OATP1-B1的SLCO1B1基因以及参与体内脂质代谢的APOE基因多态性相关 [3]。研究表明，人类SLCO1B1、ApoE基因具有多态性，其可影响他汀类药物在血浆和肝脏中的浓度，进而影响着他汀类药物的疗效及安全性 [4]。因此，为进一步探寻江西赣南地区SLCO1B1 & ApoE基因多态性的分布状况和其在治疗急性缺血性脑卒中疗效的相关性，本研究采用队列研究进行探寻分析。
2. 对象与方法
2.1. 对象
本项目采用队列研究，录入从2021年1月1日~2021年6月30日赣南医学院第一附属医院神经科住院部诊治的急性缺血性脑卒中病例。入选标准：1) 18岁以上，不限性别；2) 确诊是急性缺血性脑卒中的病例(包括TIA发作、急性脑梗死)；3) 自愿参加并签署知情同意书的患者。
2.2. 基因分型检测
将纳入此次研究的患者行基因分型(SLCO1B1和ApoE)检测。取2 ml受试者空腹状态下依地酸(EDTA)抗凝血，2小时内检测，选用产自北京诺博莱德公司的DNA提取试剂盒，应用核酸提取仪(AX-48型)完成提取。人类SLCO1B1 & ApoE基因检测试剂盒来自上海氟元生物科技有限公司。全部采集到的样本用PCR仪行PCR扩增，程序运行设置为37℃ 10 min，95℃ 5 min，95℃ 15 s，60℃ 60 s，40个循环，于最后的60℃ 60 s这个阶段采集VIC、FAM通道的荧光信号。
2.3. 统计方法
运用的软件为SPSS 22.0，均数 ± 标准差和百分率分别表示计量和计数资料。差异有统计学意义定为P < 0.05。
3. 结果
3.1. 一般资料
纳入女166例，男198例，总364例患者。年龄20~92岁，平均年龄(51.27 ± 3.28)岁。其中服用辛伐他汀患者35例(9.62%)，瑞舒伐他汀患者128例(35.16%)，阿托伐他汀患者134例(36.81%)，匹伐他汀患者67例(18.41%)。
3.2. 基因分布情况
人SLCO1B1分为4个等位基因：*1a、*1b、*5和*15；基因型包括*1a/*1a、*1a/*1b、*1b/*1b、*1a/*5、*1a/*15、*1b/*15、*5/*5、*5/*15、*15/*15，本研究中各型患者的占比依次为84 (23.08%)、94 (25.82%)、71 (19.52%)、7 (1.92%)、30 (8.24%)、53 (14.56%)、7 (1.92%)、11 (3.02%)、7 (1.92%)。ApoE基因分为3个等位基因：E2、E3、E4；基因型包括E2/E2、E2/E3、E2/E4、E3/E3、E3/E4、E4/E4，不同基因型占比分别为4 (1.10%)、16 (4.40%)、49 (13.46%)、219 (60.16%)、67 (18.41%)、9 (2.47%)。
3.3. 基因多态性与他汀类药物的相关性
结合SLCO1B1和ApoE基因型，得出以下他汀用药建议：1) ApoE基因型为E2/E4、E3/E3、E2/E2、E2/E3，且SLCO1B1基因型为*1a/*1a、*1a/*1b、*1b/*1b，则为正常代谢型，首选阿托伐他汀或瑞舒伐他汀；2) ApoE基因型为E2/E4、E3/E3、E2/E2、E2/E3，但SLCO1B1基因型为*1a/*5、*1a/*15、*1b/*15、*5/*5、*5/*15、*15/*15，则他汀类药物耐受剂量中等，药物相互作用小，但需注意匹伐他汀、辛伐他汀的肌肉毒性；3) ApoE基因型为E3/E4、E4/E4，且SLCO1B1基因型为*1a/*1a、*1a/*1b、*1b/*1b，则药物效果差，可以选择辛伐他汀，或者换用依折麦布、普罗布考等其他调血脂的药物；4) ApoE基因型为E3/E4、E4/E4，且SLCO1B1基因型为*1a/*5、*1a/*15、*1b/*15、*5/*5、*5/*15、*15/*15，则不建议单独使用中高强度他汀，同样推荐换用依折麦布、普罗布考等其他非他汀类的调血脂的药物。具体详见表1。
Table 1. Recommendations for statin administration in SLCO1B1 and ApoE genotypes
表1. SLCO1B1和ApoE基因型与他汀药物建议
4. 讨论
人类SLCO1B1基因分为4个等位基因：*1a、*1b、*5和*15，具有遗传多态性。其中SLCO1B1的突变型基因能使OATP1B1转运蛋白活性下降，减弱肝脏对他汀类药的吸收，导致他汀的血药浓度升高，从而将患肌病、横纹肌溶解症等的风险提高 [5]。人类ApoE基因分为三个等位基因：E2、E3、E4。其中E2为突变型，是阿尔兹海默症、脑卒中和冠心病的保护因子 [6]。作为野生型的E3，在对保持身体生理功能正常发挥上有关键作用 [7]。E4为突变型，与阿尔兹海默症、心脑血管病、抑郁症的高发性相关。ApoE基因突变可抑制肝脏LDL受体表达，从而会影响他汀在降脂方面的作用。另外，ApoE4携带者应用他汀后降脂效果通常很差或者无效，但是ApoE2携带者应用他汀类药物后降脂效果最佳。2017年《AACE指南》将ApoE基因分型作为冠状动脉粥样硬化性心血管疾病风险的最新风险因素。而且，有研究发现，携带APoE4基因的人群患冠心病的风险增高42% [8]。
我们的研究发现，在中国赣南地区SLCO1B1野生型(即*1a/*1a、*1a/*1b、*1b/*1b型)比例最高，达68.42%，表明这里大部分人应用他汀类药物会有正常肌病风险，对他汀药物耐受剂量相对较大；ApoE基因型中E2/E4、E3/E3型占比最高，达73.62%，属于正常基因型，降脂效果较好，患老年痴呆、卒中、冠心病的风险无明显增高。当然，对于一些杂合，甚至纯合突变的基因型，小剂量他汀联用依折麦布、普罗布考、非诺贝特等其他调脂药物非常必要，不仅可以减少肌毒性等副作用，而且可以更好地起到调脂预防疾病作用。
总之，SLCO1B1 & ApoE联合基因检测有利于个体化他汀类药物治疗。
课题来源
江西省卫健委科技计划一般项目(编号：202130693)，赣州市科技局指导性科技项目(编号：GZ2020ZSF014)。
NOTES
*通讯作者。