摘要:
目的:用腺病毒表达载体将骨活素基因转染到兔骨髓基质干细(BMSCs),复合多孔丝素蛋白支架体外构建组织工程骨。方法:用表达骨活素基因的腺病毒载体转染体外培养的兔BMSC,免疫组化、原位杂交染色和蛋白印迹方法检测细胞骨活素的表达,并通过流式细胞仪和ALP活性检测分析其对细胞增殖、分化的影响。然后将转染后细胞接种到多孔丝素蛋白支架上,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果:转染后,骨活素基因在mRNA水平和蛋白水平均有表达;S期细胞比例和ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀,伸展良好。结论骨活素基因可高效转染兔BMSC,且促进细胞增殖及成骨转化。转染后细胞在多孔丝素蛋白支架上生长良好,骨活素基因治疗的组织工程骨构建成功。