1. 引言
蝉花，我国传统名贵中药，早在1500年前的南北朝时期就已被记载于重要中药典籍《雷公炮炙论》中，是虫草科真菌蝉花菌寄生在蝉若虫上形成的一种虫草 [1] [2]。现代研究表明，蝉花含有丰富的营养物质和活性成分，具有广泛的生理功能，如增强免疫 [3] [4]、抗疲劳、抗惊厥、抗氧化、抗肿瘤、改善肾功能等 [5] [6] [7]。经工业化规模培养的蝉花子实体在2021年由国家卫健委批准为新食品原料。
蝉花菌质是采收子实体后仍布满营养菌丝和经发酵的培养基质组成的营养物质，是人工规模培育生产过程的副产物，如果作为废料被丢掉，既造成了巨大的浪费，又污染了环境。研究表明，蝉花菌质不仅含有腺苷、多糖等活性成分，还含有丰富的氨基酸、微量元素、D-甘露醇和核苷类、维生素类、多糖、硬脂酸等物质 [8] [9]，具有较高的药用及营养价值。
为了更好地开发利用蝉花虫草资源，为蝉花菌质找到一种较好的利用途径，本试验首次将蝉花菌质作为饲料原料应用于鮰鱼养殖，研究鮰鱼在使用添加有蝉花菌质的饲料时，其生产性能和鱼肉品质的改善情况，为利用蝉花菌质作为鮰鱼饲料原料以及健康、有机、特色肉品的生产提供参考依据。
2. 材料与方法
2.1. 材料
2.1.1. 试验用鱼
试验用鱼为鮰鱼种鱼，体重大约0.2 kg/尾，按照40,000尾/公顷的放养密度饲养在1公顷的池塘中。
2.1.2. 试验饲料
1) 对照组饲料
普通全价配合颗粒饲料，采用目前光明渔业供应商饲料，并添加有0.1%抗菌肽、0.2%聚维嘉、0.1%瑞安泰(茶多酚)、0.3%肝胆康及黄芪多糖等。
2) 试验组饲料
在普通全价配合饲料的基础上添加1%蝉花菌质，并去除对照组饲料中黄芪多糖与肝胆康等提高免疫力作用的材料。
2.2. 方法
2.2.1. 分组
本试验设计分为2组，对照组设置1个塘口，试验组设置1个塘口，每个塘口面积约1公顷，养殖密度为40,000尾/公顷。
2.2.2. 试验时间
养殖周期为8周(2021.9.16~2021.11.11)，每天饲喂2次，上午、下午各饲喂1次，每次饲喂200 kg颗粒饲料，其中常规颗粒饲料198 kg，蝉花菌质2 kg，其它采用相同的养殖条件，并按日常养殖规范管理。
2.2.3. 样品采集
饲养试验结束后，每个塘口不同方位随机取鮰鱼20尾，测定每尾鱼的体重、体长。心腔采血，血液经4℃冰箱静置1~2 h后，于4℃、3500 rpm离心10 min制备血清，?20℃保存备用。
2.2.4. 试验记录
1) 死亡率指标测定
死亡率 = [(试验初投入塘口鱼体尾数 ? 阶段试验末收获鱼体尾数)/试验初投入塘口鱼体尾数] × 100%
2) 增重率指标测定
增重率 = [(阶段试验末鱼体均重 ? 试验初鱼体均重)/试验初鱼体均重] × 100%
3) 饲料系数指标测定
饵料系数 = 饲料总消耗量/(试验末总重 ? 总初重)
4) 免疫指标测定
采用Elisa试剂盒测定免疫球蛋白(G、M)血清抗体水平。超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性(GSH-PX)测定采用南京建成生物工程研究所的试剂盒进行测定，具体测定方法参照试剂盒说明书。
5) 肉质营养成分测定
分别随机取对照组及实验组5尾鮰鱼，取同侧新鲜背肌用于测定营养成分。
2.2.5. 统计分析
试验数据记录后采用Excel软件进行数据整理，使用SPSS软件进行统计学分析。
3. 结果与分析
3.1. 死亡率
经过8周的生长试验，试验组塘口(添加蝉花菌质)鮰鱼的死亡率较低(12.66%)，对照组塘口鮰鱼死亡率较高(13.76%)，比试验组高了8.69%。试验结果表明添加1%蝉花菌质在一定程度上可降低鮰鱼养殖过程的死亡率，进而提高成活率(结果见表1)。
3.2. 增重率及总产量
对照组鱼体平均增重为243.76 g/尾，增重率为122%；试验组(添加蝉花菌质)平均增重为246.17 g/尾，增重率为123%；对照组的净产量为15,531.5 kg/公顷，试验组(添加蝉花菌质)的净产量为15,839 kg/公顷；与对照组相比较，试验组(添加蝉花菌质)鮰鱼产量提高了0.99% (结果见表1)。
3.3. 饲料系数
在饲料转化效率方面，对照组塘口饲料系数为2.11，试验组塘口(添加蝉花菌质)饲料系数为2.09，试验组与对照组相比无明显差异。
Table 1. Mortality rate, average weight gain rate, total output and feed coefficient of Ictalurus punctatus
表1. 各处理组鮰鱼死亡率、平均增重率、总产量和饲料系数
3.4. 免疫指标
由表2试验结果显示，与对照组相比，添加蝉花菌质的试验组免疫球蛋白IgG、IgM两个指标都高于对照组，与对照组相比分别增加了37.5%和27.08%，差异都极显著(P < 0.01)；添加蝉花菌质的试验组超氧化物歧化酶活力(SOD值)比对照组增加了41.40%，差异极显著(P < 0.01)；添加蝉花菌质的试验组谷胱甘肽过氧化物酶活性(GSH-PX)比对照组分别增加了39.87%，差异极显著(P < 0.01)。
由表2总体试验结果可知，添加蝉花菌质可提高鮰鱼机体免疫球蛋白总量、超氧化物歧化酶活力、谷胱甘肽过氧化物酶活性等指标，并使其维持较高水平，刺激抗体活性从而间接提高机体的综合免疫能力，促进机体的自身调理功能，从而降低死亡率，达到提高产量以达到增加收益的目标。
Table 2. Effect of Substrate of Cordyceps Chanhua on Immune Indexes (X ± s, n = 10)
表2. 蝉花菌质对免疫指标的影响(X ± s, n = 10)
注：**表示与对照组相比P < 0.01。
3.5. 营养五项指标
由表3试验结果显示，与对照组相比，添加蝉花菌质的试验组总体上营养五项与对照组无明显差异，添加蝉花菌质不会明显影响或降低鮰鱼肉质营养成分。
Table 3. Test results of five nutritional indicators
表3. 营养五项指标测试结果
4. 结论与讨论
超氧化物歧化酶(SOD)是生物机体中以活性氧自由基为底物的抗氧化酶，又称活性氧清除剂。超氧化物歧化酶在动物机体内可有效清除超氧阴离子自由基，在机体氧化平衡中具有重要的作用。研究表明，SOD也与水生动物的免疫水平密切相关，因此SOD可作为非特异性免疫指标来评判免疫刺激剂对机体非特异性免疫力的影响 [10] [11]。谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶。它除了具有重要的抗氧化功能外，还参与了生物体内其它重要的生理过程，例如它在维持机体免疫系统的正常运作方面具有重要的作用 [12]。
鱼类能进行体液和细胞免疫应答，其中免疫球蛋白是鱼类特异性体液免疫应答的主要介质。但无论是从鱼类免疫还是鱼病防治方面来看，免疫球蛋白IgM和IgG扮演重要的作用，是机体抗感染免疫的主力抗体 [13]。
闫文娟等研究表明，饲料中添加1%的蝉花菌质可以提高罗氏沼虾体内的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性 [14]。本试验结果显示，在饲料中添加蝉花菌质能极显著得提高鮰鱼机体免疫球蛋白含量、SOD和GSH-Px活力(P < 0.01)，增强鮰鱼的抗氧化和免疫能力，提高抗病力，减小死亡率，提高产量，增强鮰鱼养殖的抗风险能力。
综上所述，在鮰鱼养殖饲料中添加1%蝉花菌质对鮰鱼的死亡率、平均增重率、总产量等无不良影响，尚有一定改善作用；最重要的是在提高鮰鱼机体免疫力方面效果明显；对饲料系数及营养成分不会产生明显损失。结果表明：在一定添加水平内，蝉花菌质可提高鮰鱼免疫力，降低死亡率，生产健康、有机、特色肉品，最终实现产量及经济效益的提高。本研究结果表明，在鮰鱼饲料配方中适当添加蝉花菌质原料是可行的，这为新型水产配合饲料的研发奠定了基础。
NOTES
*通讯作者。