1. 引言
为了更好地保护开发利用我省野生竹荪资源，为竹荪的研究走向深入，项目组对贵州野生竹荪资源进行了调查，调查采用定位观测拍照记录。还对野生长裙竹荪不同时间段的生长状况作了观测拍照记录。竹荪品种鉴定及菌种分离工作参考相关文献 [1] - [6] 。采集的竹荪研究标本及分离的野生竹荪菌种已存入贵州省山地资源研究所。
2. 分离野生竹荪菌种培养基的配方(为缩短分离的野生竹荪菌种生长周期，切取野生竹荪菌蛋组织块直接放入二级菌种培养基上)
2.1. 竹荪菌种培养基
(1) 木屑竹叶培养基：杂木屑60%、腐殖土10%、麸皮或米糠15%、尿素1%、蔗糖2%、石膏粉2%、竹枝丫和竹枝叶粉10%、(培养基含水量60%~65%)。
(2) 木屑培养基：阔叶树木屑70%、米糠或麸皮15%、腐殖土10%、过磷酸钙2%、蔗糖3%。
(3) 麦粒种培养基：麦粒(小麦、大麦、荞麦均可，须浸泡24小时) 80%、过磷酸钙1.5%、棉籽壳(竹枝丫粉、杂木屑或草粉) 15%、石膏粉1%、石灰0.5%、蔗糖2%。
2.2. 拌料装瓶
将以上各种粉状培养基充分拌匀然后加水，可溶于水的材料要先加水溶解后，用此水溶液拌料，料的水分以手捏，指缝中有水但不下滴为宜。培养料装至瓶肩，上紧下松，料面用捣木或铁棍肩钩压平。洗净瓶壁，用干布揩干瓶颈的水。塞上棉塞不松不紧，上下等粗，塞满瓶颈，不宜过长，不能太短，棉塞外可用牛皮纸或防水纸包扎。
2.3. 消毒灭菌
将以上装瓶的培养料进行消毒灭菌，高压蒸汽灭菌1.5公斤/平方厘米，126℃，1小时后，取出放入无菌工作台内备用。
2.4. 野生竹荪菌种分离
打开紫外线杀菌灯照射10分钟左右，开起无菌空气约5分钟即可进行竹荪菌蛋组织分离。分离时要准确、快速将菌蛋组织块放入瓶内，塞上棉塞即可放入培养室培养。
2.5. 野生竹荪菌种的转接扩大
待野生竹荪组织分离的菌丝长满菌种瓶后即可进行竹荪菌种的转接扩大。
3. 竹荪野外采集、菌种分离及转接扩大
3.1. 长裙竹荪Dictyophora indusiata Fisch.
分类：鬼笔科Phallaceae。
生境：夏秋生于阔叶树桩上或竹林中地上。
用途：子实体菌柄和菌裙可食用和药用。药用具有清热润肺，补气活血，主要用于肺燥咳喘，脾胃虚弱。子实体和菌丝体具有相似的生物活性，具有降血脂，抑制肿瘤细胞作用，并能提高机体免疫能力。
图1、图2、图3、图4为对不同时间的野生长裙竹荪资源的定位观测拍照记录。
Figure 1. Wild Dictyophora indusiata Fisch. (button 1)
图1. 野生长裙竹荪(菌蕾1)
Figure 2. Wild Dictyophora indusiata Fisch. (button 2)
图2. 野生长裙竹荪(菌蕾2)
Figure 3. Wild Dictyophora indusiata Fisch. (button 3)
图3. 野生长裙竹荪(菌蕾3)
Figure 4. Wild Dictyophora indusiata Fisch. (opening umbrella)
图4. 野生长裙竹荪(开伞)
3.2. 红托竹荪Dictyophora rubrovolota Zang, ji et liou.
分类：鬼笔科Phallaceae。
生境：多生于苦竹林中腐殖土。
用途：清香型竹荪，菌盖孢体有毒；菌托食用味差；子实体菌柄和菌裙，可食用，味好，还具有较好的防腐作用；药用，据民间验方，对细菌性肠炎有较好的疗效。
图5、图6为野生红托竹荪资源定位观测拍照记录。
Figure 5. Wild Dictyophora rubrovolota Zang, ji et liou. (button)
图5. 野生红托竹荪(菌蕾)
Figure 6. Wild Dictyophora rubrovolota Zang, ji et liou. (late stage of opening umbrella)
图6. 野生红托竹荪(开伞后期)
3.3. 短裙竹荪Dictyophora duplicata (Bosc.) Fisch
分类：鬼笔科Phallaceae。
生境：多生于苦竹林中腐殖土。
用途：菌盖孢体有毒；菌托食用味差；子实体菌柄和菌裙可食用，味好，还具有较好的防腐作用；药用，据民间验方，对细菌性肠炎有较好的疗效。
图7、图8、图9、图10为野生短裙竹荪资源记录。该标本是张开江采自贵定县昌明镇斗篷山的短裙竹荪菌蛋放在贵州省山地资源研究所实验室开出的短裙竹荪子实体。
Figure 7. Wild Dictyophora duplicata (Bosc) Fisch button
图7. 短裙竹荪菌蛋
Figure 8. Wild Dictyophora duplicata (Bosc) Fisch button (unfinished umbrella opening)
图8. 短裙竹荪菌蛋(开裙未完)
Figure 9. Wild Dictyophora duplicata (Bosc.) Fisch (opening umbrella 1)
图9. 短裙竹荪子实体(开伞1)
Figure 10. Wild Dictyophora duplicata (Bosc.) Fisch (opening umbrella 2)
图10. 短裙竹荪子实体(开伞2)
3.4. 黄裙竹荪(又称杂色竹荪) Dictyophora multicolor Berk. et Br.
分类：鬼笔科Phallaceae。
生境：生于竹林下被腐殖质土覆盖的腐竹根或枯竹枝叶上。
用途：长期以来人们视自然界中野生黄裙竹荪为有毒真菌，不敢采摘食用。而自然界中野生黄裙竹荪资源已被用于治疗脚气病。
图11、图12为野生黄裙竹荪资源定位观测拍照记录。
Figure 11. Wild Dictyophora multicolor Berk. et Br. (late stage of opening umbrella 1)
图11. 野生黄裙竹荪(开伞后期1)
Figure 12. Wild Dictyophora multicolor Berk. et Br. (late stage of opening umbrella 2)
图12. 野生黄裙竹荪(开伞后期2)
3.5. 野生竹荪的组织分离
图13、图14、图15为野生竹荪蛋分离、菌种培养、转接扩大。
Figure 13. Isolation of button tissue from wild Dictyophora
图13. 野生竹荪菌蛋组织分离
Figure 14. Culture of bacterial strains after tissue separation
图14. 组织分离后菌种培养
Figure 15. Expansion and transfer of Dictyophora strains
图15. 竹荪菌种转接扩大
4. 小结
通过我省野生竹荪资源的定位观测拍照记录结果，对今后从事野生竹荪资源调查的研究人员提供一些帮助，同时对同行进行野生竹荪资源的生态学研究也将提供一定的借鉴。开展贵州野生资源长裙竹荪调查，除了采用定位观测拍照记录，在野生长裙竹荪不同时间段的生长状况作了观测拍照记录，进一步深入了解到贵州野生长裙竹荪的生长发育分化过程。贵州野生竹荪菌种的分离培养对我省竹荪种子资源库的建设以及同行在这一领域的研究提供一些帮助和借鉴。有关贵州野生竹荪资源的分布规律及深入开发利用有待进一步的研究。
成果转化项目
贵州省成果转化项目(黔科合成果[2022]一般049)。
NOTES
*通讯作者。