1. 引言
自从20世纪90年代提出这一概念以来，量子点的研究逐步多元化。在其发展初期，人们并未想过将其应用于生物和医学等相关领域，它多被应用于光电学和半导体材料等领域。后来因研究发展多元化再加上量子点独特的光学性能，人们开始将其应用于生物医学检测等相关领域。它独特而优异的光学性能和特征是其成为优异荧光染料的夯实基础。作为一种新型荧光染料，它具有许多有机染料不具备的性能。它良好的光稳定性，可控制的发射光谱，宽激发谱和窄发射谱，良好的生物相容性等光学特点，使其区别于传统有机染料，成为相关科研发展的新宠。它自身所独有而优异的性能与特征让其在许多领域应用和发展前景广阔。
随着量子点研究的深入，人们开始对量子点的功能化修饰进行探索。功能化修饰量子点研究的出现与发展让量子点的应用具有更多可能性。功能化量子点免疫光学传感器，荧光探针，荧光免疫检测等适用于许多生物医学方面研究。本篇主要重点阐述了功能化量子点在免疫分析上的相关应用，并总结了当下免疫分析主要方法的优缺点，近年来功能化量子点进一步的研究与应用，以及新型光免疫传感器等。
2. 免疫分析主要方法
2.1. 量子点荧光探针
荧光探针是免疫分析中的常用方法，而量子点荧光探针相对于前者来说却是一种新方法。究其原因，则是量子点材料与过往使用的材料的不同。量子点的优异性能使荧光探针能在更多应用中起到良好的效果。
2.2. 酶免疫分析技术
这是一种传统的免疫分析技术。它将酶的高效催化原理和特异性应用其中，实现对检测物的特异性检测。酶与免疫分析的结合对检测结果的可靠性进行了优良改进。具有仪器简单，对人员无危害等优点。该技术在农业等领域中应用广泛。
2.3. 放射免疫分析
1959年建立的一种免疫分析技术，它利用放射性同位素标记实现高灵敏度，但其放射性也对操作人员具有一定危害。现发展水平在国内外不尽相同，国外产品较多，国内与国外相比具有一定差距。
2.4. 时间分辨荧光免疫分析
该免疫技术是一种非放射性免疫技术，利用镧系元素及其螯合物作为示踪物。这是对示踪物的一种改进。它所利用的示踪物也有独特的荧光性能，能很大程度的排除干扰。
以上是对近年来相关免疫分析技术的简要列举和介绍。随着应用需求增加，许多免疫技术也随之出现并有所发展。但就现有的免疫分析技术来说，没有一种技术是尽善尽美的，这说明相关研究仍需深入。如下表1，则是对免疫分析主要技术的总结和优缺点的对比。
Table 1. Summary of main methods of immunoassay
表1. 免疫分析主要方法总结
近年来随着荧光免疫分析技术迅速发展，它被广泛应用于各种微量物质测定。而现代荧光免疫分析技术主要有以下四个设想：1) 开发更灵敏的荧光增强体系；2) 多组分分析物免疫分析；3) 均相现代荧光免疫分析技术；4) 与其他技术联用 [5] 功能化量子点的出现很好实现的相关设想，在一定程度上弥补了传统有机染料的缺点。李圆圆等人合成了碲化镉(CdTe)量子点，通过利用共价偶联建立了cFLISA方法，与之前的FITC-二抗法比较，其灵敏度提高了30倍 [11]。这说明量子点的功能化修饰和应用，可以有效弥补一些基于传统染料而建立的一些方法在实际应用上的不足。Goldman等人的实验研究成果完成了现代免疫分析技术的相关设想，成功实现多组分分析测定物质。此实验采用颜色相异的量子点标记，在一块免疫检测微孔板上同时测定了四种不同的物质 [12]。这次试验的成功说明了量子点能实现有关同时多组分物质分析与测定现代免疫分析设想。基于此结果可见不同功能化量子点材料具有不同性能优势，而进一步探索多元化功能量子点材料有助于开拓其更广阔的应用和发展前景。
3. 功能化量子点多种研究
庄庆一等人利用再沉淀包覆法成功制备出具良好水溶性的掺杂绿光的CdSe@ZnS纳米颗粒G-NPs和掺杂红光CdSe@ZnS的纳米颗粒R-NPs，并在此基础上进一步研究了量子点间能量传递现象。该法很好的保留了量子点原来的性质，对人类肝细胞肝癌细胞株(HepG2)进行荧光标记，结果可得所制备的纳米颗粒具有良好吞噬效果 [13]。
Lingao Ruan等人以量子点QDs作为标记，建立了一种原位检测单细胞凋亡的新方法。用PEG修饰QDs制备荧光标记探针并进一步研究了细胞对不同表面修饰的QDs的非特异性吸附，发现非特异性吸附效果比之前相关学者的研究效果有着明显降低。结果证明PEG修饰的QDs是检测细胞凋亡的敏感荧光标记探针 [14]。
Bolu Sun等人采用原位聚合法制备聚苯胺功能化石墨烯量子点(PAGD)，建立一种电化学免疫传感器，用于抑郁症的热休克蛋白70 (HSP70)早期筛查。PAGD具有良好的生物活性和优良结构，使多种热休克蛋白70 (HSP70)能牢固加载于其表面，比之前人的检测方法，新型传感器能对此蛋白进行更便捷有效的检测。此外，该传感器还成功应用于等离子体样品中HSP70检测 [15]。
Yan Ping等人通过两步法热裂解法制备了D-青霉胺共功能化石墨烯量子点(PEHA-GQD-DPA)，该量子点由平均尺寸为3.16 nm的石墨烯片和丰富的官能团组成。经功能化修饰后的石墨烯量子点具有更强的荧光发射能力，其荧光量子产率高达90.91%，对Hg2+有灵敏、并具有选择性的光学响应。对荧光的猝灭作用可被谷胱甘肽恢复 [16]。
杨广武等人制备了氧化锌和碳量子点复合物(ZnO/C-QDs)。该复合物由水溶性荧光氧化锌量子点和碳量子点合成。且发现通过对两种制备原料间体积比例的调整，可制备出能实现荧光光谱连续可调的复合物；还可以通过不同比例混合制备来实现量子点荧光颜色的改变 [17]。
Zhengyi Qu等人以谷胱甘肽功能化石墨烯量子点(GQDs@GSH)为基础，开发了一种用于ACP活性和PM检测的灵敏荧光纳米传感器(GQDs@GSH)。GQDs@GSH的荧光可通过荧光共振能量转移得到有效猝灭。在酸性环境中将MnO2纳米片还原为Mn2+，可导致其荧光强度显著升高 [18]。
杜青青等人为了更高效、快速的检测槲皮素，制备了高效发光硅烷功能化碳点，并用此碳点制备了新型荧光探针。在其合成过程中，柠檬酸和硅烷偶联剂是关键物质。通过水热法合成所得碳点在360 nm激发后在450 nm处有强荧光发射峰，其荧光量子产率可达69.2% [19]。
Jue Xu等人招募DNA模板化的CdTe/CdS量子点(DNA-QDs)作为电化学记录者。提供了一种新的电化学方法检测IL-8，它可以方便的结合DNA模板量子点。避免复杂耗时的抗体-DNA偶联物或功能纳米材料制备过程。DNA模板量子点的研究也在迅速发展中 [20]。
Devika Vashisht等人提出了一种用磷酸盐功能化石墨氮化碳量子点(Ph-g-CNQDs)测定水中亚铁离子和铁离子的简便方法。以油酸为溶剂的简单溶剂热法在30 min内产生了Ph-g-CNQDs。亚铁离子和铁离子之间的通讯使蓝色的Ph-g-CNQDs荧光信号被猝灭。量子产率为60.54%。该方法有良好回收率，适于实时监测 [21]。
Xiaodan Wang等人以巯基乙酸为表面活性剂，制备了单分散的CdTe量子点水溶液，用其构造荧光探针，检测普罗帕酮。因为CdTe量子点表面有化学吸附的硫代乙醇酸，所以量子点带正电荷。普罗帕酮在酸性介质中为正电荷，通过静电吸引和氢键作用与CdTe量子点结合形成较大的离子缔合络合物。此外，形成的离子缔合络合物可以增加CdTe量子点的共振瑞利散射(RRS)、二阶散射(SOS)和频率双散射(FDS)的强度，并猝灭CdTe量子点的荧光 [22]。
以上是对近几年功能化量子点研究的介绍，基于此，笔者将提到的相关量子点材料及其优缺点做了如下总结。
4. 功能化量子点材料优势及其所弥补缺点
由于量子点材料的优越性质及多元功能化修饰后展现出更多不同的特点，使其已广泛应用于探针显影 [23]，荧光传感器 [24]，生物分子多模态成像 [25] [26] 等。在农业，化工，生物医学等领域有着广泛应用及研究。目前基于酶的量子点研究以及其他许多与量子点的联合研究已成为国内外热点，据表2可见量子点不同功能化修饰能带来不同效果，量子点的一些研究和应用充满潜力。随着科学技术发展，有望研究开发出更多优异性能，使其更好应用于生活生产。
Table 2. Summary of functionalized quantum dot materials
表2. 功能化量子点材料总结
小结：对于功能化量子点可从不同角度，不同特性，不同材料等方面进行研究，进行多元化结合研究，以便能获得更多成过和突破。国内应稳步将功能化量子点材料投入应用生产。随着人们意识提高，科技发展，基于功能化量子点优异性能以及研究潜力，功能化量子点的未来研究应用前景将十分广阔。
基金项目
国家自然科学基金项目批准号：21701069。辽宁省自然基金指导计划，2019-ZD-0607。大学生创新创业项目，《纳米孔ITQ-44分子筛限域合成碳量子点的研究》，《LTA分子筛修饰的磺胺甲恶唑电化学传感器研究》，《基于分子筛修饰的磷酸氯喹电化学传感器的研制与应用》。