摘要: 目的：探讨口腔鳞状细胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma, OSCC)组织中血小板衍生生长因子-BB (Platelet-Derived Growth Factor-BB, PDGF-BB)蛋白的表达情况与患者临床病理特征的关系。方法：收集2020年6月至2025年6月在我科住院经病理组织学检查诊断为OSCC患者的相关临床资料及石蜡组织标本共126例，采用免疫组织化学染色检测OSCC组织中PDGF-BB蛋白的表达情况，并分析其与患者临床病理特征的相关性。结果：OSCC组织中PDGF-BB蛋白的阳性表达率为77.0% (97/126)，显著高于癌旁正常组织13.3% (4/30)，差异有统计学意义(P < 0.05)；PDGF-BB蛋白的表达与OSCC肿瘤T分期(肿瘤直径)、颈部淋巴结转移以及远处脏器转移相关(P < 0.05)，而与患者的年龄、性别、肿瘤部位及组织分化程度无关(P > 0.05)。结论：PDGF-BB蛋白在OSCC组织中呈高表达，其表达与肿瘤T分期、颈部淋巴结转移及远处脏器转移密切相关，可能是评估OSCC患者预后的潜在生物学标志物。
Abstract: Objective: To investigate the relationship between the expression of platelet-derived growth factor-BB (PDGF-BB) protein in oral squamous cell carcinoma (OSCC) tissues and the clinicopathological characteristics of patients. Methods: Clinical data and tumor tissue specimens from 126 patients diagnosed with OSCC by histopathological examination in our department from June 2020 to June 2025 were collected. Immunohistochemical staining was used to detect the expression of PDGF-BB protein in OSCC tissues, and its correlation with clinicopathological features was analyzed. Results: The positive expression rate of PDGF-BB protein in OSCC tissues was 77.0% (97/126), significantly higher than that in adjacent normal tissues (13.3%, 4/30), with a statistically significant difference (P < 0.05). The expression of PDGF-BB protein was correlated with OSCC T stage (tumor diameter), cervical lymph node metastasis, and distant organ metastasis (P < 0.05), but not with age, gender, tumor location, or degree of tissue differentiation (P > 0.05). Conclusion: PDGF-BB protein is highly expressed in OSCC tissues, and its expression is closely related to tumor T stage, cervical lymph node metastasis, and distant organ metastasis. It may serve as a potential biological marker for evaluating the prognosis of OSCC patients.
1. 引言
口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)是口腔颌面部常见的恶性肿瘤之一，发病率在全球范围内呈逐渐上升趋势，尽管近年来在OSCC的诊断和治疗方面取得了一定进展，但患者的总体生存率仍不理想，5年生存率仅为50%左右[1]。肿瘤的局部侵袭和远处转移是OSCC患者治疗效果不理想和预后差的主要原因，因此，深入研究OSCC侵袭和转移的分子机制，寻找有效的诊断和预后标志物具有重要的临床意义。血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF)是一类由多种细胞分泌的促有丝分裂因子，在细胞增殖、迁移、血管生成及微淋巴管生成等多个过程中发挥着不可替代的重要作用。PDGF家族包括PDGF-A、PDGF-B、PDGF-C和PDGF-D四个成员，其中PDGF-BB是由两个PDGF-B链组成的同源二聚体，具有较强的生物学活性，PDGF-BB在多种恶性肿瘤组织中呈高表达，且与肿瘤的生长、侵袭、转移及预后密切相关[2]。本研究采用免疫组织化学染色法检测OSCC组织及癌旁正常组织中PDGF-BB蛋白的表达情况，并分析其与患者临床病理特征的相关性，旨在探讨PDGF-BB在OSCC发生发展中的作用及其潜在的临床应用价值，以期为OSCC的治疗提供依据。
2. 资料与方法
2.1. 研究对象
选取2020年6月至2025年6月在我院口腔颌面外科接受外科手术治疗OSCC患者126例，收集其石蜡组织标本及相关临床资料，包括年龄，性别，肿瘤部位，肿瘤直径(T分期)，分化程度，有无颈部淋巴结转移及远处脏器转移等资料。
2.2. 纳入标准与排除标准
纳入标准：① 所有组织标本经病理组织学检查明确诊断为OSCC；② 所有患者术前均未接受放疗、化疗或其他抗肿瘤治疗；③ 均为原发于口腔黏膜的鳞状细胞癌；④ 临床资料完整(包括患者年龄，性别，发病部位，肿瘤直径，分化程度，有无颈部淋巴结转移或远处脏器转移等临床资料)；⑤ 所有患者均签署知情同意书。
排除标准：① 未经病理组织学检查明确诊断，仅临床诊断为OSCC；② 合并严重全身系统性疾病者(如肝肾功能衰竭，血液系统性疾病)；③ 依存性差，无法遵嘱复诊者；④ 临床资料不完整或无法获取者。
2.3. 主要试剂与仪器
兔抗人PDGF-BB多克隆抗体、免疫组织化学检测试剂盒、二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司；苏木精染液购自上海源叶生物科技有限公司。光学显微镜(日本Olympus公司)、电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)、切片机(德国Leica公司)等。
2.4. 免疫组织化学检测PDGF-BB蛋白的表达
所有组织标本均经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片，厚度为4 μm。采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白–过氧化物酶(streptavidin-peroxidase, SP)法检测PDGF-BB蛋白的表达。具体步骤如下：切片常规脱蜡至水，3%过氧化氢溶液室温孵育10 min以阻断内源性过氧化物酶活性；枸橼酸盐缓冲液(pH 6.0)微波修复抗原；正常山羊血清封闭30 min；滴加兔抗人PDGF-BB多克隆抗体(1:200稀释)，4℃孵育过夜；次日，PBS冲洗后滴加生物素标记的二抗，室温孵育30 min；再滴加链霉亲和素–过氧化物酶复合物，室温孵育30 min；DAB显色，苏木精复染，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。
2.5. 结果判定
PDGF-BB蛋白阳性产物主要定位于细胞核和/或细胞质，呈棕黄色颗粒。根据染色强度及阳性细胞占全部细胞数的百分比对结果进行判定[3]：① 染色强度评分：未着色记为0分，淡黄色记为1分，黄色记为2分，棕黄色或褐色记为3分。② 阳性细胞百分比评分：阳性细胞数 ≤ 5%为0分；阳性细胞数6%~25%为1分；阳性细胞数26%~50%为2分；阳性细胞数51%~75%为3分，阳性细胞数 > 75%为4分；以上述两项评分的乘积为最终评分。③ 最终结果判定：评分 ≤ 6分为低表达，评分 > 6分为高表达。
2.6. 统计学分析
采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析，计数资料以率(%)表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
3. 结果
3.1. OSCC组织及癌旁正常组织中PDGF-BB蛋白的表达
免疫组织化学染色结果显示，PDGF-BB蛋白在OSCC组织中的阳性表达主要定位于细胞核和/或细胞质，呈棕黄色颗粒；而在癌旁正常组织中，仅少数细胞呈弱阳性表达或阴性表达(见图1)。OSCC组织中PDGF-BB蛋白的阳性表达率为77.0% (97/126)，显著高于癌旁正常组织的13.3% (4/30)，差异有统计学意义(χ2 = 20.571, P < 0.001) (见表1)。
Figure 1. Expression of PDGF-BB in adjacent cancer tissues and OSCC tissues (immunohistochemical staining)
图1. PDGF-BB在癌旁组织和OSCC组织中的表达情况(免疫组织化学染色)
Table 1. Statistical analysis of PDGF-BB expression in adjacent cancer tissues and OSCC tissues (Example, %)
表1. PDGF-BB在癌旁组织和OSCC组织中的表达情况统计分析表(例，%)
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PDGF-BB蛋白表达情况 |
|
高表达 |
低表达 |
癌旁组织 |
4 (13.3) |
26 (86.7%) |
OSCC组织 |
97 (77.0%) |
29 (23.0%) |
χ2 |
72.34 |
P值 |
<0.001 |
3.2. PDGF-BB蛋白表达与OSCC患者临床病理特征的关系
126例患者中，男性72例，女性54例，年龄32~79岁，平均年龄61.7岁，中位年龄为63岁，好发于舌，口底及颊黏膜，其次为牙龈及腭部，上颌窦以及颌骨等其他部位较少。PDGF-BB蛋白的表达与患者的年龄、性别、肿瘤部位及分化程度无关(P > 0.05)。值得注意的是，PDGF-BB蛋白的表达与肿瘤分期及颈部淋巴结转移情况有关，在T1-T2期患者中，PDGF-BB 蛋白的阳性表达率为63.27% (31/49)，而在T3-T4期患者中，阳性表达率为85.71% (66/77)，差异有统计学意义(χ2 = 9.32, P = 0.002)；有淋巴结转移患者的PDGF-BB蛋白阳性表达率为73.81% (31/42)，高于无淋巴结转移患者的54.76% (46/84)，差异有统计学意义(χ2 = 4.68, P = 0.031)；PDGF-BB蛋白在发生远处脏器转移患者的表达阳性率为87.50% (28/32)，高于未发生远处脏器转移者71.28% (67/94)，差异有统计学意义(χ2 = 3.84, P = 0.039) (见表2)。
Table 2. Relationship between PDGF-BB protein expression and clinical pathological features in OSCC tissues (Example, %)
表2. OSCC组织中PDGF-BB蛋白表达与临床病理特征之间的关系(例，%)
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PDGF-BB蛋白表达情况 |
χ2值 |
P值 |
临床病理特征 |
高表达 |
低表达 |
性别 |
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男(n = 72) |
58 (80.55) |
14 (19.45) |
|
0.271 |
女(n = 54) |
39 (72.22) |
15 (27.78) |
1.21 |
年龄 |
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≤63岁(n = 29) |
21 (72.41) |
8 (27.59) |
|
0.484 |
>63岁(n = 97) |
76 (78.35) |
21 (21.65) |
0.49 |
部位 |
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|
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|
舌(n = 39) |
31 (79.49) |
8 (20.51) |
|
0.990 |
口底(n = 29) |
22 (75.86) |
7 (24.14) |
|
颊(n = 25) |
19 (76.00) |
6 (24.00) |
|
牙龈(n = 23) |
17 (73.91) |
6 (26.09) |
|
腭(n = 4) |
3 (75.00) |
1 (25.00) |
|
其他(n = 6) |
5 (83.33) |
1 (16.67) |
0.56 |
肿瘤直径(T分期) |
|
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|
|
≤4 cm (T1~T2) (n = 49) |
31 (63.27) |
18 (36.73) |
|
0.002 |
>4 cm (T3~T4) (n = 77) |
66 (85.71) |
11 (14.29) |
9.32 |
分化程度 |
|
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|
高–中分化(n = 68) |
52 (76.47) |
16 (23.53) |
|
0.882 |
低分化(n = 58) |
45 (77.59) |
13 (22.41) |
0.02 |
淋巴结转移 |
|
|
|
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有(n = 42) |
31 (73.81) |
11 (26.19) |
|
0.031 |
无(n = 84) |
46 (54.76) |
38 (45.24) |
4.68 |
远处转移 |
|
|
|
|
有(n = 32) |
28 (87.50) |
4 (12.50) |
|
0.039 |
无(n = 94) |
67 (71.28) |
27 (28.72) |
3.84 |
4. 讨论
OSCC的发生发展是一个多因素、多步骤的复杂过程，涉及多种基因和信号通路的异常调控。PDGF-BB作为一种重要的生长因子，在肿瘤的发生、发展中发挥着关键作用。本研究结果显示，PDGF-BB蛋白在OSCC组织中的阳性表达率显著高于癌旁正常组织，提示PDGF-BB可能参与了OSCC的发生过程。
进一步分析PDGF-BB蛋白表达与OSCC患者临床病理特征的关系发现，PDGF-BB蛋白的表达与肿瘤T分期、淋巴结转移及远处脏器密切相关[4]。在T3-T4期、有淋巴结转移及远处脏器转移的患者中，PDGF-BB蛋白的阳性表达率明显升高，这表明PDGF-BB蛋白的高表达可能促进了OSCC的侵袭和转移，导致肿瘤的进展。已有研究证实，PDGF-BB可以通过多种途径促进肿瘤的侵袭和转移[5]。一方面，PDGF-BB可以与肿瘤细胞表面的PDGF受体(PDGFR)结合，激活下游的信号通路，如PI3K-Akt、Ras-Raf-MEK-ERK等，促进肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力[6]；另一方面，PDGF-BB还可以诱导肿瘤血管生成和淋巴管生成，为肿瘤细胞的生长和转移提供必要的营养和转移途径[7]。付明刚等学者对乳腺导管癌的临床病理特征分析发现：PDGF-BB的高表达与肿瘤的pTNM分期及淋巴结转移相关，且PDGF-BB可以通过诱导淋巴管生成促进肿瘤细胞的淋巴转移[8]。在口腔癌的研究中发现：PDGF-BB还通过调控肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)的转化，间接促进肿瘤细胞的侵袭和迁移，PDGF-BB通过激活LURAP1L-AS1/LURAP1L/IKK/NF-κB信号通路，诱导成纤维细胞向CAFs转化，进而分泌促侵袭因子如MMPs，增强OSCC细胞的迁移能力[9]。
此外，本研究还发现PDGF-BB蛋白的表达与OSCC患者的年龄、性别、肿瘤部位及组织分化程度无关，这与部分研究结果一致，但也有研究报道PDGF-BB的表达与肿瘤的组织分化程度有关，这种差异可能与研究对象、样本量、检测方法等因素有关，需要进一步扩大样本量进行深入研究。
尽管现有研究提示PDGF-BB在OSCC中的潜在临床价值，但其作为预后标志物或治疗靶点仍需进一步验证。目前的研究多集中于分子机制，缺乏大样本的临床队列研究。此外，不同研究中检测PDGF-BB的方法(如免疫组化评分标准)和样本量差异可能导致结果不一致。未来需开展多中心、前瞻性研究，明确PDGF-BB表达与OSCC患者预后的直接关联，并探索靶向PDGF-BB的联合治疗策略。
PDGF-BB在OSCC中的高表达与肿瘤侵袭、淋巴结转移、晚期分期及不良预后密切相关，其作用机制涉及淋巴管生成、CAFs活化及肿瘤微环境调控。尽管现有证据多来自其他癌症类型和机制研究，但其在OSCC中的潜在临床价值已得到初步验证。未来需进一步整合临床数据和分子机制，以明确PDGF-BB在OSCC中的具体作用，并推动其转化应用。
基金项目
湖北医药学院人才启动金项目(2019QDJZR15)。
NOTES
*第一作者。
#通讯作者。