1. 引言
沙棘(Hippophae rhamnoides)是“三北”地区生态建设和工业原料林建设的重要材料 [1]，经济开发潜力很大 [2]。很长一段时间沙棘开发的主要器官为果实，对叶子开发一般不予触及。后来受全球市场银杏叶黄酮开发利用和营销的启发，国内开始对沙棘叶保健茶做了探索开发 [3]，但也仅利用了很少的一点沙棘叶资源，占领的市场份额就少之又少了。沙棘叶中的黄酮是已知十分重要的物质 [4] [5]，事实上类似物质应该还有不少，只是以往在此方面做的工作不多。本文通过对沙棘叶中与药用、食用有关的总黄酮、总多酚、多糖和生物碱4个保健成分的测定分析，希望为沙棘茶等保健品甚至药品的加工利用提供科学基础，进一步推动沙棘资源建设和开发利用步伐，造福于民，切实巩固“三北”地区的扶贫攻坚成果。
2. 材料与方法
用于分析的沙棘叶来源于华北土石山区的辽宁朝阳和黄土高原的甘肃庆阳。测试沙棘均位于种植园，包括6a的杂交沙棘、引进沙棘和中国沙棘3大类，其中辽宁朝阳有6个种或品种，甘肃庆阳有8个种或品种。
为了更好地掌握整个生长期的药食类叶营养成分变化规律，沙棘叶取样时间定在2018年5月、6月、7月、8月、9月，其中庆阳对6月，朝阳、庆阳对8月各取样2次，其他各月取样1次，这样朝阳、庆阳全年就分别取样6次、7次。取样后将叶样品在室内摊开阴干，送交化验机构，按照有关规范要求，开展药食类主要营养成分测定分析。其中：
总黄酮用分光光度法，以芦丁为标准品绘制曲线，外标法定量。
总多酚用分光光度法，以没食子酸为标准品绘制曲线，外标法定量。
多糖用苯酚硫酸法，以葡萄糖为标准物质，分光光度法绘制标准曲线，外标法定量。
生物碱用分光光度法，以盐酸小檗碱为标准品绘制曲线，外标法定量。
3. 结果与分析
沙棘叶含有的4个药食类主要营养成分到底如何，需要对其取样进行系统分析，才能据以开展科学的开发利用。
3.1. 总黄酮
总黄酮指黄酮类化合物，是许多中草药利用的十分重要的有效成分。与沙棘果相比，沙棘叶中总黄酮的含量能高出2.5~64倍 [6]，沙棘叶黄酮具有降脂、抗氧化、抗炎、抗心血管疾病等作用。
辽宁朝阳2018年对6种参试沙棘干叶总黄酮逐月取样测定结果，列于表1。
Table 1. Total flavonoids contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Chaoyang, Liaoning
表1. 辽宁朝阳参试沙棘干叶逐月总黄酮含量
从表1中可以看出，3个雌株类的黄酮全年平均含量，以中国沙棘(雌)最高，达2.35%，引进大果沙棘“丘伊斯克”次之，为2.10%，“杂雌优54号”较低，为1.84%，占中国沙棘(雌)含量的78.3%。3个雄株类的黄酮全年平均含量，以引进沙棘授粉树“格诺姆”，达2.20%，中国沙棘(雄)次之，为1.96%，“杂雄优1号”较低，为1.69%，占“格诺姆”含量的76.8%。在辽宁朝阳，雌、雄两类沙棘黄酮全年平均含量相比，雌株类平均为2.10%，雄株类平均为1.95%，雌株类较雄株类大0.15个百分点，差距不大。
再来看月度之间的黄酮含量节律变化。在辽宁朝阳，总体样品干叶总黄酮含量以5月、6月、7月这3次测定值为高，分别为2.75%、2.73%和2.74%；8月上旬、下旬和9月这3次平均含量较低，分别为1.41%、1.28%和1.44%。各参试沙棘干叶总黄酮与总体变动情况基本相近。
甘肃庆阳参试沙棘干叶总黄酮2018年逐月取样测定结果，列于表2。
Table 2. Total flavonoids contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Qingyang, Gansu
表2. 甘肃庆阳参试沙棘干叶逐月总黄酮含量
注：9月10日采样时，“杂雌优12号”、“格诺姆”叶子已落，没采到样品(下同)。
从表2中可以看出，5个雌株类沙棘的黄酮全年平均含量，以“杂雌优12号”最高，达2.41%，中国沙棘(雌)稍低，为2.15%。4个杂雌沙棘黄酮含量的平均值为1.94% (1.60%~2.41%)，较中国沙棘(雌)含量低0.21个百分点。3个雄株类沙棘的黄酮全年平均含量，以中国沙棘(雄)为高，达2.11%，“杂雄优1号”与引进沙棘授粉树“格诺姆”含量接近，分别为1.98%和1.95%，较中国沙棘(雄)低0.13和0.16个百分点。在甘肃庆阳，雌、雄两类沙棘黄酮全年平均含量相比，雌株类平均为1.98%，雄株类平均为2.01%，雌株类较雄株类小0.03个百分点，差距甚微。
从甘肃庆阳月度间的干叶总黄酮平均值来看，5月至7月取样测定的4次结果显示出干叶总黄酮平均含量均在2%以上，而8月至9月3次测定结果均在2%以下。5月30日取样测定的平均含量达2.89%，为一最高值，而最低值出现在9月10日取样测定的，仅为1.20%。各参试沙棘干叶总黄酮与总体变动情况基本相似。
3.2. 总多酚
酚类是由一个6碳(芳香环或轮状环)组成的化合物，具有强大的输送电子能力。当人类摄入多酚后，多酚就变成巨大的自由基清除剂使机体受益。沙棘叶中总多酚含量同样显著高于果实 [7]。
辽宁朝阳参试沙棘干叶总多酚2018年取样测定结果，列于表3中。
Table 3. Total polyphenol contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Chaoyang, Liaoning
表3. 辽宁朝阳参试沙棘干叶逐月总多酚含量
在辽宁朝阳，6个参试沙棘从5月至9月共计6次取样测定的干叶总多酚年平均值十分接近，总体平均值为1.69%，各参试沙棘间差异很小(1.66%~1.74%)。雌、雄类总多酚年平均值分别为1.71%和1.67%，仅相差0.04个百分点。
从5月至9月的6个取样时间点(表3)来看，6个参试沙棘的干叶总多酚平均值，以5月至7月的3次测定结果为高，平均含量1.98% (1.96%~2.02%)；而8月至9月的3次测定结果较低，平均含量1.40% (1.31%~1.45%)。5月下旬取样测定平均值为最大值(2.02%)，而8月下旬取样测定值为最小值(1.31%)。6个参试沙棘干叶总多酚个体与总体测定情况基本相近。
甘肃庆阳参试沙棘干叶总多酚2018年逐月取样测定结果，列于表4中。
Table 4. Total polyphenol contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Qingyang, Gansu
表4. 甘肃庆阳参试沙棘干叶逐月总多酚含量
在甘肃庆阳，参试5个雌株类沙棘的干叶总多酚平均含量，仅“杂雌优12号”含量达1.71%，较中国沙棘(雌)的1.65%略高，其余3种杂雌沙棘含量均小于中国沙棘(雌)。参试3个雄株类沙棘的干叶总多酚平均含量，以“杂雄优1号”最高，为1.62%，高于其他两种。总多酚含量对比发现，中国沙棘雌、雄类总多酚年平均值分别为1.65%和1.56%，相差0.09个百分点，这点与总黄酮的情况基本一致。
从月度间8个参试沙棘干叶总多酚平均值(表4)来看，6月30日平均达2.08%为最高，次高点为7月20日的2.04%，其余点含量均较低。不过总体来看，还是5月至7月的平均含量(1.87%)较高，比8月以后取样测定平均值(1.12%)高。各参试沙棘干叶总多酚个体情况与总体情况基本相似。
3.3. 多糖
多糖是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物。沙棘叶中含有丰富的水溶性多糖，具抗氧化、抑菌等活性 [8]，有开发成功能性食品的潜力。
辽宁朝阳参试沙棘干叶多糖2018年取样测定结果，列于表5中。
Table 5. Polysaccharide contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Chaoyang, Liaoning
表5. 辽宁朝阳参试沙棘干叶逐月多糖含量
在辽宁朝阳，3个雌株类沙棘多糖含量，以“杂雌优54号”最低，仅6.30%，而引进“丘伊斯克”达8.91%，不过最高的当属中国沙棘(雌)，达9.65%，比“杂雌优54号”净高出3.35个百分点。3个雄株类沙棘多粮含量，“杂雄优1号”最低，仅5.80%，而引进授粉树“格诺姆”高达8.19%，中国沙棘(雄)为6.15%。“格诺姆”较“杂雄优1号”多糖含量净高出2.39个百分点。雌雄两类沙棘多糖含量对比，雌株类达8.29%，较雄株类的6.71%高出1.57个百分点；特别是，中国沙棘雌株(9.65%)较雄株(6.15%)净高出3.5个百分点。
表5还显示出，从5月下旬至8月下旬，5个时间点干叶多糖的平均值在7月中旬达8.34%，出现一个极值，两侧平均值均依次下降。不过在9月上旬平均值又增至9.74%，成为逐月测定的最大值。细看各参试沙棘测定值，发现除了9月上旬最大值较多外，引进“丘伊斯克”在8月上旬为最大值，9月上旬为次大值；中国沙棘雌株在8月上旬有次大值；“杂雄优1号”的最大值出现在7月中旬，“格诺姆”的次大值也出现在7月中旬。干叶多糖个体测定值与总体平均值的逐月测定值趋势并不完全一致，需要就参试沙棘具体分析，选择最佳时间取样利用。
甘肃庆阳参试沙棘干叶多糖2018年取样测定结果，列于表6中。
Table 6. Polysaccharide contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Qingyang, Gansu
表6. 甘肃庆阳参试沙棘干叶逐月多糖含量
从表6中可以看出，5个雌株类型沙棘多糖含量，除“杂雌优12号”较中国沙棘(雌)的5.37%高出1.02个百分点外，其余各杂雌沙棘的干叶平均多糖含量均小于中国沙棘雌株，其中以“杂雌优10号”全年平均含量最低，仅4.26%。3个雄株类型沙棘多糖含量，以“杂雄优1号”全年平均含量最低，仅5.4%，较引进授粉树“格诺姆”低1.09个百分点，比中国沙棘(雄)低2.20个百分点。雌雄两类沙棘多糖含量对比，雌株类达5.52%，较雄株类的6.50%低0.98个百分点；特别是中国沙棘多糖全年平均含量，雌株较雄株低1.62个百分点，与辽宁朝阳趋势截然相反。
从月度间的参试沙棘干叶多糖含量平均值(表6)来看，年内逐月间波动较大，其中9月10日出现了最大值(7.31%)，7月20日为次大值(6.91%)；6月30日出现了最小值(4.30%)，相邻的6月15日出现了次小值(5.15%)。不过就具体参试沙棘来看，其趋势与总体是有差别的。如“杂雌优10号”、“杂雌优12号”的含量最大值均出现在7月20日，“格诺姆”出现在5月30日，中国沙棘(雄)最大值出现在8月25日。可见，干叶多糖个体测定值与总体平均值之间相差太大，总体趋势不足代替单个参试沙棘，需要按个体的测定情况来确定最佳取样时间。
3.4. 生物碱
生物碱是存在于自然界(主要为植物)中的一类含氮的碱性有机化合物，为中草药重要的有效成分，也是形成茶叶滋味的重要物质，具有增强大脑皮质的兴奋程度、减少疲乏感等生理功能 [9]。
辽宁朝阳参试沙棘干叶生物碱2018年取样测定结果，列于表7中。
Table 7. Alkaloid contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Chaoyang, Liaoning
表7. 辽宁朝阳参试沙棘干叶逐月生物碱含量
表7中显示出6个参试沙棘干叶生物碱总体平均值为111.1 mg/100g，个体间的差别不大，最大值为中国沙棘(雌)，为115.6 mg/100g，实际上与次大值“杂雄优1号”十分接近(115.5 mg/100g)；最小值为“格诺姆”，其含量为101.8 mg/100g，仅比最大值低13.8 mg/100g，相当于13.6%。雌雄两类沙棘干叶生物碱含量对比，雌株类达111.6 mg/100g，较雄株类的110.0 mg/100g大1.6 mg/100g，相当于1.5%，可见差距甚微。
6个参试沙棘总体干叶生物碱平均含量在月度之间的节律(表7)，在6月下旬出现最大值(179.4 mg/100g)，次大值出现在紧邻的7月中旬(138.0 mg/100g)，6月下旬至7月中旬这两个时间点形成干叶生物碱测定值的高峰段，然后向前后时间点递减。最小值出现在8月下旬，仅71.4 mg/100g (相当于最大值的40.0%)。各参试沙棘干叶生物碱所出现的变化节律与总体平均值基本相仿。
甘肃庆阳参试沙棘干叶生物碱2018年取样测定结果，列于表8中。
表8中显示出8个参试沙棘干叶生物碱总体平均值为118.7 mg/100g，种或品种间差别较大，最大值、次大值分别为中国沙棘(雄)和引进授粉树“格诺姆”，分别为132.6 mg/100g、130.6 mg/100g；最小值为“杂雄优1号”，含量仅91.1 mg/100g，比最大值低41.5 mg/100g，相当于低了31.3%。雌雄两类沙棘干叶生物碱含量对比，雌株类达119.5 mg/100g，较雄株类的118.1 mg/100g大1.4 mg/100g，相当于1.2%，可见差距也甚微。中国沙棘雌、雄株的干叶生物碱含量均很高。
Table 8. Alkaloid contents of monthly dry leaves of seabuckthon in Qingyang, Gansu
表8. 甘肃庆阳参试沙棘干叶逐月生物碱含量
在全年7次取样时间轴上，参试沙棘干叶生物碱总体的平均值(表8)在6月30日达186.8 mg/100g，为一个极值也是最大值，极值两侧，向前下降至5月30日第1次取样测定的58.9 mg/100g，向后下降至8月25日倒数第2次取样测定的70.6 mg/100g。6月15日至7月20日可视为一个生物碱高含量时间段，期间的3次取样测定值位居全年前3之列。各参试沙棘所出现的干叶生物碱含量变化节律与总体平均值基本相似。
4. 结论与讨论
辽宁朝阳、甘肃庆阳两地参试沙棘基本类型均包括雌株和雄株两大类，也均有杂交沙棘、引进沙棘和中国沙棘，不同的是朝阳有6个参试沙棘，而庆阳为8个参试沙棘。测试分析主要以黄酮、多酚含量高为依据，选择适用的沙棘种或品种及采叶时间，以获取最佳叶资源，用来制作沙棘茶叶或生产其他沙棘保健品或药品。
两地生长季5月至6月采样分析的沙棘干叶总黄酮含量最高，此期适合沙棘采叶，以获取高的总黄酮含量。中国沙棘(雌、雄株)干叶总黄酮平均含量(2.14%)高于引进沙棘(2.08%)和杂交沙棘(1.89%)。参试沙棘干叶总黄酮含量的平均值以辽宁朝阳略高，达2.06%，较甘肃庆阳的1.99%大0.07个百分点，十分接近。
两地生长季5月至7月的沙棘干叶总多酚含量最高，此期适合沙棘采叶，以获取高的总多酚。中国沙棘(雌、雄株)干叶总多酚平均含量(1.66%)高于引进沙棘(1.63%)和杂交沙棘(1.58%)。参试沙棘干叶总多酚含量的平均值以辽宁朝阳略高，达1.69%，较甘肃庆阳的1.56%大0.13个百分点，差距不大。
两地8月上旬至9月上旬的沙棘干叶多糖含量最高。引进沙棘干叶多糖平均含量(7.86%)稍高于中国沙棘(雌、雄株) (7.35%)，较杂交沙棘(5.59%)大2.27个百分点。参试沙棘干叶多糖含量的平均值以辽宁朝阳略高，达7.74%，较甘肃庆阳的5.91%大0.83个百分点，有一定的差距。
两地6月中旬至7月中旬的生物碱含量最高，此期适合沙棘采叶，以获取高的生物碱。中国沙棘(雌、雄株)干叶生物碱平均含量(121.0 mg/100g)高于引进沙棘(114.1 mg/100g)和杂交沙棘(112.9 mg/100g)。参试沙棘干叶生物碱含量平均值以甘肃庆阳为高，达118.7 mg/100g，较辽宁朝阳的111.1 mg/100g低7.6 mg/100g，相当于6.8%。这是4个主要保健指标中惟一的一个指标，以甘肃庆阳的测定值为高，其余均以辽宁朝阳含量高。
除多糖这个指标，为8月至9月的含量最高外，其余3个指标最高值均位于5月至7月时间段。因此，确定以5月至7月作为采叶期，获取更高的总黄酮、总多酚和生物碱，用于制作保健茶叶或生产其他保健用品或药品。
在3大类沙棘资源中，从总黄酮、总多酚和生物碱含量综合评判，以中国沙棘最为适合制作沙棘茶叶等保健产品。
基金项目
水利部财政项目：水土保持业务(126216223000200001)。