1. 引言
黄连是一种常用的中药材，为毛茛科植物黄连(Coptis chinensis Franch.)、三角叶黄连(Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao)、云南黄连(Coptis teeta Wall.)的干燥根茎，又分别称“味连”、“雅连”、“云连” [1] 。黄连始载于《神农本草经》，被列为上品，具有清热燥湿、泻火解毒的功效，常用于治疗泄泻痢疾、消渴、痈疮肿毒等 [2] 。黄连药材中含有生物碱类、木脂素类、黄酮类、酸性成分等 [3] [4] [5] ，其药用价值与黄连所含生物碱密切相关，其中小檗碱为最丰富、最具代表性的化合物 [6] 。现代药理学研究表明小檗碱具有抗菌、抗病毒、降糖降脂、抗肿瘤、保护心脑血管等药理活性作用 [7] [8] [9] [10] [11] 。中药配方颗粒是传统中药汤剂的改良产品，在临床使用中有方便服用和携带，即冲即服的优点 [12] [13] 。目前，关于黄连的薄层鉴别主要集中于黄连药材或含黄连制剂，鲜少见对黄连药材及其配方颗粒的薄层研究。因此，本研究对药典的色谱条件进行优化，建立不同批次黄连药材及其配方颗粒的薄层色谱研究方法。
2. 仪器与试药
2.1. 仪器
高效硅胶G板(青岛海洋化工厂)；点样毛细管(上海长城科学仪器商店)；KQ-100E型超声波提取器(昆山市超声仪器有限公司)；WFH-203B型暗箱式紫外分析仪(北京顺科达科技有限公司)。
2.2. 试药
盐酸小檗碱购于成都瑞芬思生物科技有限公司，其余试剂均为分析纯，水为纯净水，18批黄连(味连)和黄连配方颗粒的样品信息见表1。
3. 方法与结果
3.1. 2020版《中华人民共和国药典》方法与结果
Figure 1. TLC of Coptis chinensis under Pharmacopoeia of the People’s Republic of China (Note: S10: Berberine hydrochloride; S1~S5: Coptis chinensisl test sample; S11~S14: Test sample of Coptis chinensis formula granules, Temperature: 16˚C, relative humidity: 77%)
图1. 《中国药典》项下黄连的薄层色谱图(注：S10：盐酸小檗碱；S1~S5：黄连药材供试品；S11~S14：黄连配方颗粒供试品；温度：16℃，相对湿度：77%)
各取9批黄连药材粉末0.25 g，加甲醇25 ml，超声处理30分钟，滤过，取滤液作为黄连药材供试品溶液。各取9批黄连配方颗粒粉末0.25 g，同上述方法制备黄连配方颗粒供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成0.5 mg/mL的对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2020版通则0502)试验，分别吸取上述溶液各1 μL点于同一高效硅胶G薄层板上，以为环己烷–乙酸乙酯–异丙醇–甲醇–水–三乙胺(3:3.5:1:1.5:0.5:1)为展开剂，置用浓氨试液预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。
结果显示：5批黄连药材和4批黄连配方颗粒供试品色谱图谱中，在与盐酸小檗碱对照品色谱相应位置上，显示相同颜色的斑点，部分斑点形成色带，未能完全分离，详见图1。
3.2. 优化方法及结果
Figure 2. Optimized TLC of Coptis chinensis (Note: S10. Berberine hydrochloride; S1-S9. Coptis chinensis; Temperature: 27˚C, relative humidity: 74%)
图2. 优化的黄连药材薄层色谱图(注：S10：盐酸小檗碱；S1~S9：黄连药材；温度：27℃，相对湿度：74%)
Figure 3. Optimized TLC of Coptis chinensis formula granules (Note: S10: Berberine hydrochloride; S11~S19: Coptis chinensis formula granules; Temperature: 27˚C, relative humidity: 74%)
图3. 优化的黄连颗粒薄层色谱图(注：S10：盐酸小檗碱；S11~S19：黄连配方颗粒；温度：27℃，相对湿度：74%)
Figure 4. Optimized TLC of Coptis chinensis and its formula granules (Note: S1~S9: Coptis chinensis; S10: Berberine hydrochloride; S11~S19: Coptis chinensis formula granules; Temperature: 27˚C, relative humidity: 74%)
图4. 优化的黄连药材及颗粒薄层色谱图(注：S1~S9：黄连药材；S10：盐酸小檗碱；S11-S19：黄连配方颗粒；温度：27℃，相对湿度：74%)
供试品溶液和对照品溶液制备方法同“3.1”项下，分别吸取提取的供试品溶液和对照品溶液各1 μL点于同一高效硅胶G薄层板上，以为环己烷–乙酸乙酯–异丙醇–甲醇–水–三乙胺(2:4:1:1.5:0.5:2)为展开剂，置用浓氨试液预饱和20分钟的展开缸内，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。
色谱结果显示：9批黄连药材和9批黄连配方颗粒供试品色谱中，与盐酸小檗碱对照品色谱相应位置上，显示相同颜色的斑点，斑点清晰，且各斑点分离度好，详见图2、图3和图4。
4. 讨论
薄层色谱法(TLC)具有成本低、分析时间短、结果直观性强等优点，目前仍被广泛用于中药的定性鉴别分析中 [14] 。在本研究中，优化后的薄层色谱斑点清晰、斑点之间分离度好，可用于黄连(味连)及其配方颗粒的简单定性鉴别，为黄连配方颗粒质量标准的提升与建立提供了参考依据。但该研究仍存在不足：黄连化学成分复杂，仅以小檗碱作为对照客观性和专属性不够强，应增加对照品的种类。
NOTES
*第一作者。
#通讯作者。