黄花棘豆的化学成分研究

Studies on the Chemical Constituents of Oxytropis ochrocephala Bunge

摘要: 黄花棘豆(Oxytropis ochrocephala Bunge)是豆科(Fabaceae)、棘豆属(Oxytropis DC)多年生草本植物，含有种类丰富的化合物，有较强的生物活性。为了探究黄花棘豆的化学成分，对提取物使用多种柱层析分离纯化，并使用核磁共振波谱法结合相关文献鉴定了13种化合物。

Abstract: Oxytropis ochrocephala Bunge is a perennial herb of Fabaceae and Oxytropis DC. It contains a variety of compounds and has strong biological activity. In order to explore the chemical constituents of Oxytropis ochrocephala Bunge, the extracts were isolated and purified by various column chromatography, and 13 compounds were identified by nuclear magnetic resonance spectroscopy combined with relevant literature.

1. 引言

黄花棘豆(学名：Oxytropis ochrocephala Bunge)是豆科(Fabaceae)、棘豆属(Oxytropis DC)多年生草本植物，在我国西北地区的牧场草地广泛分布。黄花棘豆的毒性经常导致人类饲养的牲畜中毒死亡，从而给当地的牧民带来严重的经济损失。近些年来，由于土地荒漠化，过度放牧等因素，黄花棘豆在西藏，甘肃，青海等地快速蔓延，逐渐成为当地的优势物种，威胁了地区植物多样性[1]。其强大的繁殖能力使其在现存的优质草场中能很快占据优势地位，破坏了牧区的生态环境，需要用生物防治、化学方式、物理隔离等方法减轻对畜牧业的影响[2]。但与此同时，黄花棘豆还具有较高的营养价值，在有丰富的粗蛋白和粗纤维的同时，Ca和P的含量也显著高于其它棘豆属植物，经过合理的处理方法如脱毒可用于畜牧业生产，是潜在的饲料牧草[3]。黄花棘豆拥有较强的适应能力，能在寒冷干燥地带快速繁殖，拥有固沙和防治沙化的能力，对相对脆弱的生态环境有着一定的正面意义。如何合理的利用其毒性，也是科学家研究的重点[4]。

黄花棘豆中化学成分十分丰富，有生物碱、黄酮类、三萜类、木脂素、甾体等化合物约300种，其中相关化合物有杀虫、抗菌、抗肿瘤、抗乙型肝炎病毒、化感作用、抗氧化、抗缺氧等生物活性[5]。

本文使用从青海省高原牧场采集而来的黄花棘豆，将其根茎粉碎后用乙醇浸泡，通过减压浓缩得到总浸膏，调节总浸膏的PH值，使用二氯甲烷萃取得到酸萃部分和碱萃部分。减压浓缩后通过不同的色谱柱层析，通过薄层色谱(TLC)分析化合物的分离状况，决定是否使用高效液相色谱(HPLC)进行进一步的分离纯化。将得到的化合物结合核磁共振波谱法(NMR)波谱数据，查阅文献确定结构。用以上方法鉴定出了13个单体化合物。

2. 实验部分

2.1. 实验仪器与试剂材料

核磁共振共振仪(BRUKER AV 500 MHz) (Rudolph Research Analytical, USA)，高效液相色谱仪(LC-2030C) (Shimadzu, Japan)，旋转蒸发仪(EYELA N-1300) (上海爱朗仪器有限公司)，循环水式真空泵(SHZ-DIII) (郑州亚荣仪器有限公司)，电子分析天平(FA1004) (浙江力辰仪器有限公司)，超声波清洗机(KQ-250B) (昆山市超声仪器有限公司)，可调式微量移液枪(200~1000 μL) (浙江拓派医疗器械有限公司)。D-101型大孔树脂(西安蓝晓科技新材料股份有限公司)，葡聚糖凝胶(北京元宝山色谱技术有限公司)，柱层层析硅胶、薄层层析硅胶板(青岛海洋化工厂)，柱层层析反相硅胶(Merck, Germany)，分析纯二氯甲烷、甲醇、乙酸乙酯、石油醚、丙酮(天津大茂化学试剂厂)、色谱级甲醇、乙腈(云南新蓝景化学工业有限公司)，娃哈哈纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司)，氘代氯仿、氘代甲醇(上海麦克林生化科技股份有限公司)。本课题使用的黄花棘豆，于2020年9月在青海省西宁市采集，经青海师范大学确生教授鉴定为豆科(Leguminosae)棘豆属(Oxytropis DC)黄花棘豆(Oxytropis ochrocephala Bunge)，植物标本存放于兰州交通大学博学楼(六号实验楼) 517。

2.2. 提取与分离

将采集得到的黄花棘豆根茎干燥后，用粉碎机切成小段得到15.80 kg碎片，使用工业乙醇浸泡提取3次，每次7天，减压浓缩后得到总浸膏1.25 kg。将得到的浸膏用50℃的温水进行捻溶，加入2% HCl溶液调节至pH = 1~3，用二氯甲烷萃取3次，减压浓缩得到二氯甲烷酸性条件粗提物330.12 g；之后在水相中加入2% NaOH溶液调节至pH = 11~13，用二氯甲烷萃取3次，减压浓缩得到二氯甲烷碱性条件粗提物8.70 g。将二氯甲烷酸性条件粗提物(330.12 g)，经过大孔树脂柱层析，以甲醇：水(0%, 30%, 50%, 80%, 100%)为洗脱剂梯度洗脱，得到5个组分A~E。

将组分D (87.53 g)用正相柱层析(二氯甲烷/甲醇，100:0~0:100)得到组分D1~D10。将D5 (9.92 g)用正相柱层析(二氯甲烷/甲醇，100:1~1:1)得到组分D5-1~D5-8，将D5-6 (0.37 g)用HPLC (甲醇/水，70:30)得到化合物1 (t_R = 19.62 min, 4.2 mg)。将D5-3 (1.24 g)用反相柱层析(水/甲醇，70:30)然后使用葡聚糖凝胶柱层析(二氯甲烷/甲醇，1:1)得到化合物2 (3.3 mg)。将D5-4 (0.46 g)用正相柱层析(石油醚/乙酸乙酯，10:1)得到化合物3 (6.2 mg)。将D4 (6.79 g)用正相柱层析(二氯甲烷/甲醇，100:1~1:1)得到组分D4-1~D4-5。将D4-3 (1.43 g)用反相柱层析(水/甲醇，100:0~0:100)得到组分D4-3-1~D4-3-8。将D4-3-2 (0.25 g)用正相柱层析(石油醚/乙酸乙酯，30:1)得到化合物4 (12.3 mg)。将D4-4 (1.76 g)用正相柱层析(石油醚/乙酸乙酯，10:1)后使用HPLC (甲醇/水，60:40)得到化合物5 (t_R = 24.62 min, 9.3 mg)和化合物6 (t_R = 39.24 min, 2.6 mg)。

将组分C (16.02 g)用正相柱层析(二氯甲烷/甲醇，100:0~0:100)得到组分C1~C5。将C5 (4.36 g)用反相柱层析(水/甲醇，100:0~0:100)得到组分C5-1~C5-11。将C5-4 (0.45 g)用葡聚糖凝胶柱层析(二氯甲烷/甲醇，1:1)得到化合物7 (2.6 mg)。将C5-5 (0.78 g)用正相柱层析(二氯甲烷/甲醇，5:1)后用葡聚糖凝胶柱层析(二氯甲烷/甲醇，1:1)得到化合物8 (56.2 mg)和化合物9 (25.1 mg)。将C3 (2.06 g)用正相柱层析(二氯甲烷/甲醇，100:1~1:1)得到组分C3-1~C3-8。将C3-6 (0.24 g)用正相柱层析(石油醚/乙酸乙酯，2:1)后使用HPLC (甲醇/水，60:40)得到化合物10 (t_R = 9.19 min, 5.8 mg)。将C3-3 (0.13 g)用正相柱层析(二氯甲烷/甲醇，100:1)结晶得到化合物11 (14.4 mg)。将C3-2 (0.16 g)用正相柱层析(石油醚/乙酸乙酯，5:1)后使用HPLC (甲醇/水，60:40)得到化合物12 (t_R = 17.88 min, 47.2 mg)和化合物13 (t_R = 19.82 min, 22.8 mg)。

3. 结果与讨论

化合物1：无色晶体，易溶于甲醇和氯仿，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₂₀H₂₂O₆。¹H-NMR谱显示了3组芳氢6.90 (2H, brs)，6.88 (2H, d, J = 8.0 Hz)，6.82 (2H, dd, J = 8.0, 1.9 Hz)，1组甲氧基3.91 (6H, s)，2组氧亚甲基4.25 (2H, m)，3.88 (2H, m)，一组氧次甲基4.74 (2H, d, J = 4.4 Hz)，一组次甲基3.10 (2H, m)；综合来看可以得知化合物1是一个对称结构。¹³C-NMR谱显示了6组芳香碳146.8~114.4，其中145.2和146.7与氧原子相连，1组甲氧基碳56.1，2组连氧碳71.8和86.0，和1组次甲基碳54.3。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃), δ_H: 6.90 (2H, brs, H-2, 2’), 6.88 (2H, d, J = 8.0 Hz, H-5, 5’), 6.82 (2H, dd, J = 8.0, 1.9 Hz, H-6, 6’), 4.74 (2H, d, J = 4.4 Hz, H-7, 7’), 4.25 (2H, m, H-9b, 9’b), 3.91 (6H, s, 2 × OCH₃), 3.88 (2H, m, H-9a, 9’a), 3.10 (2H, m, H-8, 8’); ¹³C-NMR (126 MHz, CDCl₃), δ_C: 146.8 (C-4, 4’), 145.3 (C-3, 3’), 133.0 (C-1, 1’), 119.1 (C-6, 6’), 114.4 (C-5, 5’), 108.7 (C-2, 2’), 86.0 (C-7, 7’), 71.8 (C-9, 9’), 56.1 (OCH₃), 54.3 (C-8, 8’)。将化合物1的核磁数据与参考文献[6]对比发现几乎一致，确定化合物为松脂素。

化合物2：无色晶体，易溶于甲醇和氯仿，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₇H₁₈O₅。¹H-NMR谱显示了5个芳氢6.93 (1H, d, J = 8.1 Hz)，6.64 (1H, d, J = 8.5 Hz)，6.60 (1H, d, J = 8.6 Hz)，6.39 (1H, br.d, J = 8.1 Hz)，6.37 (1H, br.s)，2个甲氧基3.90 (3H, s)，3.88 (3H, s)，以及异黄烷的特征信号2.90 (2H, m)，3.54 (1H, m)，3.98 (1H, t, J = 10.3 Hz)，4.28 (1H, d, J = 10.4 Hz)。¹³C-NMR谱显示了12个芳香碳信号155.3~103.3，其中155.25，155.14，146.81，145.43，138.83与氧原子相连，2个甲氧基碳61.2，56.4，1个氧亚甲基碳70.6，其余的为亚甲基和次甲基碳31.9，31.5。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃), δ_H: 6.93 (1H, d, J = 8.1 Hz, H-5), 6.64 (1H, d, J = 8.5 Hz, H-6’), 6.60 (1H, d, J = 8.6 Hz, H-5’), 6.39 (1H, br.d, J = 8.1 Hz, H-6), 6.37 (1H, br.s, H-8), 4.28 (1H, d, br.d, J = 10.4 Hz, H-2b), 3.98 (1H, t, J = 10.3 Hz, H-2a), 3.90 (3H, s), 3.88 (3H, s), 3.54 (1H, m, H-3), 2.90 (2H, m, H-4). ¹³C-NMR (126 MHz, CDCl₃), δ_C: 155.3 (C-7), 155.1 (C-9), 146.8 (C-2’), 145.4 (C-4’), 138.8 (C-3’),130.5 (C-5), 127.6 (C-1’), 117.1 (C-6’), 114.7 (C-10), 108.1 (C-6), 106.7 (C-5’), 103.4 (C-8), 70.6 (C-2), 61.2 (4’-OCH₃), 56.4 (2’-OCH₃), 31.9 (C-3), 31.5 (C-4)。将化合物2的核磁数据与参考文献[7]对比发现几乎一致，确定化合物为3’,7-二羟基-2’,4’-二甲氧基异黄烷。

化合物3：黄色油状物，易溶于甲醇和氯仿，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₁H₁₈O₃。¹H-NMR谱显示了3个甲基1.92 (3H, s)，1.78 (3H, s)，0.85 (3H, s)，4个亚甲基1.85 (2H, m)，1.27 (6H, m)。¹³C-NMR谱显示了1个酯羰基172.8，1组双键碳158.4，125.2，1个双氧代季碳107.5，3个甲基碳14.0，10.9，8.5，其余的为亚甲基碳36.0，31.7，22.7，22.5。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃), δ_H: 1.92 (3H, s, H-11), 1.85 (2H, m, H-6), 1.78 (3H, s, H-12), 1.27 (6H, m, H-7, 8, 9), 0.85 (3H, dd, J = 13.5, 6.5, H-10). ¹³C-NMR (126 MHz, CDCl₃), δ_C: 172.8 (C-2), 158.4 (C-4), 125.2 (C-3), 107.5 (C-5), 36.0(C-6), 31.7 (C-7), 22.7 (C-8), 22.5 (C-9), 14.0 (C-10), 10.9 (C-11), 8.5 (C-12)。将化合物3的核磁数据与参考文献[8]对比发现几乎一致，确定化合物为Hydroxydihydrobovolide。

化合物4：无色粉末，易溶于丙酮，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₅H₁₁NO₂。¹H-NMR谱显示了化学位移值在7.88~6.97间共有10个氢原子，初步判断化合物含有两个苯环，其中值得注意的是7.67 (1H, s)处有一个单峰质子，初步判断为是连接两个苯环的2,5-二取代恶唑环。¹³C-NMR谱显示共有15个碳原子，除去两个苯环还剩3个，组成了一个恶唑环。¹H-NMR (500 MHz, Acetone), δ_H: 7.84 (2H, m, H-2”, 6”), 7.67 (1H, s, H-4), 7.63 (2H, m, H-3’, 4’), 7.50 (2H, m, H-3”, 5”), 7.39 (2H, m, H-4”, 5’), 7.01 (1H, m, H-6’). ¹³C-NMR (126 MHz, Acetone), δ_C: 161.7 (C-2), 158.8 (C-2’), 152.1 (C-5), 131.1 (C-5’), 129.9 (C-5”), 129.9 (C-3”), 129.7 (C-1’), 129.3 (C-4”), 129.0 (C-1”), 125.0 (C-6”), 125.0 (C-2”), 124.7 (C-4), 118.5 (C-6’), 118.3 (C-4’), 113.7 (C-3’)。将化合物4的核磁数据与参考文献[9]对比发现几乎一致，确定化合物为2-(2’-羟基苯基)-5-苯基恶唑。

化合物5：无色固体，易溶于甲醇，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₅H₁₅NO₂。¹H-NMR谱显示了10个芳氢7.80~7.23，确定为两个单取代苯环，1个苄基氢4.91 (1H, dd, J = 7.9, 4.8 Hz)，1个化学位移值较大的亚甲基上的两个氢3.64 (1H, dd, J = 13.5, 4.8 Hz)，3.54 (1H, dd, J = 13.5, 7.9 Hz)。¹³C-NMR谱显示了12个芳香碳144.0~127.2，1个酰胺键上的羰基碳170.6，1个连氧苄基碳73.6，以及1个与氮原子相连的亚甲基48.8。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 7.78 (2H, br.d, J = 8 Hz, H-2’, 6’), 7.51 (1H, br.t, J = 8 Hz, H-4’), 7.44 (2H, br.t, J = 8 Hz, H-3’, 5’), 7.42 (2H, br.d, J = 7 Hz, H-2, 6), 7.34 (2H, br.t, J = 7 Hz, H-3, 5), 7.27 (1H, br.t, J = 7 Hz, H-4), 4.91 (1H, dd, J = 7.9, 4.8 Hz, H-7), 3.64 (1H, dd, J = 13.5, 4.8 Hz, H-8a), 3.54 (1H, dd, J = 13.5, 7.9 Hz, H-8b). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 170.6 (C-7’), 144.0 (C-l), 135.7 (C-l’), 132.7 (C-4’), 129.5 (C-3’), 129.5 (C-5’), 129.4 (C-3), 129.4 (C-5), 128.7 (C-4), 128.3 (C-2’), 128.3 (C-6’), 127. 2 (C-2), 127.2 (C-6), 73.6 (C-7), 48.8 (C-8)。将化合物5的核磁数据与参考文献[10]对比发现几乎一致，确定化合物为N-benzoyl-β-hydroxyphenylethylamin。

化合物6：无色固体，易溶于甲醇和氯仿，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₆H₁₇NO₂。¹H-NMR谱显示了10个芳氢7.39~7.00，可以确定为两个单取代苯环，1个氧代苄基氢4.87 (1H, s)，2个苄基氢2.75 (2H, m)，两个化学位移值较大的亚甲基氢3.58 (1H, m)，3.47 (1H, m)。¹³C-NMR谱显示了12个芳香碳139.5~126.7，1个酰胺键上的羰基碳172.2，1个氧代苄基碳74.3，1个苄基碳35.7，以及1个与连氮亚甲基40.9。¹H-NMR (500 MHz, CDCl₃), δ_H: 7.38-7.00 (m, 10H, H-2~6, 2’~6’), 4.97 (1H, s, 4.8 Hz, H-7’), 3.58 (1H, m, H-8a), 3.47 (1H, m, H-8b), 2.75 (2H, m, H-7). ¹³C-NMR (126 MHz, CDCl₃), δ_C: 172.2 (C-8’), 139.5 (C-l), 138.6 (C-l’), 129.1 (C-2’), 129.1 (C-6’), 128.9 (C-3’), 128.9 (C-5’), 128.8 (C-3), 128.8 (C-5), 127.0 (C-2), 127.0 (C-6), 127. 0 (C-4’), 126.7 (C-4), 74.3 (C-7’), 40.9 (C-8), 35.7 (C-7)。将化合物6的核磁数据与参考文献[11]对比发现几乎一致，确定化合物为(R)-2-Hydroxy-N-phenethyl-2-phenylacetamide。

化合物7：无色液体，易溶于甲醇和氯仿，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₆H₉NO。¹H-NMR谱显示了2组双键氢7.03 (2H, d, J = 8.1 Hz)和6.70 (2H, d, J = 8.1 Hz)，判断为对称结构，1个连氧亚甲基上的两个氢3.68 (2H, d, J = 7.2 Hz)，1个亚甲基上的两个氢2.71 (2H, d, J = 7.2 Hz)。¹³C-NMR谱显示了2组双键碳130.9，116.1，查阅资料初步认定为吡咯环上的4个碳，1个连氧亚甲基碳64.6，1个亚甲基碳39.4。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 7.03 (2H, d, J = 8.1 Hz, H-3, 5), 6.70 (2H, d, H-4, 6), 3.68 (2H, t, J = 7.2 Hz, H-1), 2.71 (2H, t, J = 7.2 Hz, H-2). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 130.9 (C-3), 130.9 (C-5), 116.1 (C-4), 116.1 (C-6), 64.6 (C-1), 39.4 (C-2)。将化合物7的核磁数据与参考文献[12]对比发现几乎一致，确定化合物为1-(2-羟乙基)吡咯。

化合物1~13结构如图1所示。

Figure 1. Structure of compounds 1~13

图1. 化合物1~13结构图

化合物8：白色晶体，易溶于甲醇，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₀H₁₀O₄。¹H-NMR谱显示了3个芳氢7.12 (1H, d, J = 2.0 Hz)，7.02 (1H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz)和6.78 (1H, d, J = 8.2 Hz)，2个双键上的氢7.62 (1H, d, J = 15.9 Hz)，6.34 (1H, d, J = 15.9 Hz)，1个甲氧基3.83 (3H, s)。¹³C-NMR谱显示了6个芳香碳150.5，149.2，127.6，124.1，116.4，111.7，1个羧基碳168.9，2个双键碳147.2，115.1，1个甲氧基碳56.4。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 7.62 (1H, d, J = 15.9 Hz, H-7), 7.12 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-2), 7.02 (1H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz, H-5), 6.78 (1H, t, J = 8.2 Hz, H-6), 6.34 (1H, d, J = 15.9 Hz, H-8), 3.83 (3H, s, OCH₃). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 168.9 (C-9), 150.5 (C-3), 149.2 (C-4), 147.2 (C-7), 127.6 (C-1), 124.1 (C-6), 116.4 (C-5), 115.1 (C-8), 111.7 (C-2), 56.4 (OCH₃)。将化合物8的核磁数据与参考文献[13]对比发现几乎一致，确定化合物为阿魏酸。

化合物9：无色油状物，易溶于甲醇，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₄H₂₀O₆。¹H-NMR谱显示了5个芳氢7.29~7.14 (5H, m)，1个亚甲基上的两个氢2.94 (2H, m)，1个连氧亚甲基上的两个氢4.09 (1H, m)，3.75 (1H, m)，剩下的为葡糖糖上的氢。¹³C-NMR谱显示了6个芳香碳140.0~129.3，1个连氧亚甲基碳71.7，1个亚甲基碳37.2，1个葡萄糖的桥头碳104.4，以及其它5个碳78.1，77.9，75.1，71.6，62.7。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 7.29~7.14 (5H, m, H-2, 3, 4, 5, 6), 4.09 (1H, m, H-8a), 3.75 (1H, m, H-8b), 2.94 (2H, m, H-7). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 140.0 (C-1), 130.0 (C-2), 130.0 (C-6), 129.3 (C-3), 129.3 (C-5), 127.2 (C-4), 71.7 (C-8), 37.2 (C-7)。葡萄糖：104.4 (C-1’)，78.1 (C-3’)，77.9 (C-5’)，75.1 (C-2’)，71.6 (C-4’)，62.7 (C-6’)。将化合物9的核磁数据与参考文献[14]对比发现几乎一致，确定化合物为2-苯乙基-β-D-葡萄糖苷。

化合物10：无色晶体，易溶于甲醇，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₇H₇NO。¹H-NMR谱显示了5个芳氢7.50~7.01，除此之外没有别的氢，初步判断为一个二取代苯环。¹³C-NMR谱显示了6个芳香碳135.0~128.6，1个酰胺基碳172.5。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 7.88 (2H, m, H-3, 7), 7.56 (1H, m, H-5), 7.47 (2H, m, H-4, 6). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 172.5 (C-1), 135.0 (C-5), 132.9 (C-2), 129.5 (C-3), 129.5 (C-7), 128.6 (C-4), 128.6 (C-6)。将化合物10的核磁数据与参考文献[15]对比发现几乎一致，确定化合物为苯甲酰胺。

化合物11：白色晶体，易溶于甲醇，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₆H₁₅NHCl。¹H-NMR谱很简单，只有两个峰，可以初步判断为对称结构，分别为亚甲基上的氢3.24 (2H, q, J = 7.3 Hz)，甲基上的氢1.35 (3H, t, J = 7.3 Hz)，结合起来看是乙基。¹³C-NMR谱显示了连氮亚甲基碳47.8和甲基碳9.3，结合氢谱和碳谱得知化合物含有三乙胺结构。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 3.24 (6H, q, J = 7.3 Hz, 3 × ─CH₂), 1.35 (9H, t, J = 7.3 Hz, 3×─CH₃). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 47.8 (3 × ─CH₂), 9.3 (3 × ─CH₃)。将化合物11的核磁数据与参考文献[16]对比发现几乎一致，确定化合物为三乙胺盐酸盐。

化合物12：无色晶体，易溶于甲醇和氯仿，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₇H₆O₃。¹H-NMR谱显示了4个芳氢7.49~7.00，除此之外没有别的氢，初步判断为一个二取代苯环。¹³C-NMR谱显示了6个芳香碳158.6~117.2，1个羧基碳170.6。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 7.49 (1H, m, H-6), 7.44 (1H, m, H-2), 7.26 (1H, t, J = 7.9 Hz, H-5), 7.00 (1H, dd, J = 8.2, 2.0 Hz, H-4). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 170.6 (C-7), 158.6 (C-1), 133.1 (C-3), 130.4 (C-5), 122.3 (C-4), 121.0 (C-6), 117.2 (C-2)。将化合物12的核磁数据与参考文献[17]对比发现几乎一致，确定化合物为间羟基苯甲酸。

化合物13：白色粉末，易溶于甲醇，综合¹H-NMR与¹³C-NMR数据推测该化合物分子式为C₁₄H₁₈O₉。¹H-NMR谱显示了3个芳氢7.26 (1H, t, J = 8.4 Hz)，6.75 (1H, d, J = 8.4 Hz)，6.58 (1H, d, J = 8.4 Hz)，1个甲氧基上的氢3.89 (3H, s)，其余的为葡萄糖上的氢。¹³C-NMR谱显示了6个芳香碳159.6~108.0，1个酯基碳170.5，1个甲氧基碳52.8，1个葡萄糖上的桥头碳102.8，以及其他5个碳78.3，77.9，75.0，71.2，62.5。¹H-NMR (500 MHz, MeOD), δ_H: 7.26 (1H, t, J = 8.4 Hz, H-5), 6.75 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-3), 6.58 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-5), 3.89 (3H, s, OCH₃). ¹³C-NMR (126 MHz, MeOD), δ_C: 170.5 (C-7), 159.6 (C-2), 158.2 (C-6), 134.0 (C-4), 111.6 (C-1), 110.7 (C-5), 108.0 (C-3), 52.8 (OCH₃)。葡萄糖：102.8 (C-1’)，78.3 (C-3’)，77.9 (C-5’)，75.0 (C-2’)，71.2 (C-4’)，62.5 (C-6’)。将化合物13的核磁数据与参考文献[18]对比发现几乎一致，确定化合物为methyl 2-β-D-glucopyranosyloxy-6-hydroxybenzoate。

4. 结论

对黄花棘豆根茎部分的二氯甲烷酸萃物用多种柱层析(高效液相色谱、葡聚糖凝胶柱层析、正相柱层析、反相柱层析)进行分离纯化，结合核磁共振谱和文献作比较鉴定出了13个化合物，分别为：松脂素(1)，3’,7-二羟基-2’,4’-二甲氧基异黄烷(2)，Hydroxydihydrobovolide(3)，2-(2’-羟基苯基)-5-苯基恶唑(4)，N-benzoyl-β-hydroxyphenylethylamin(5)，(R)-2-Hydroxy-N-phenethyl-2-phenylacetamide(6)，1-(2-羟乙基)吡咯(7)，阿魏酸(8)，2-苯乙基-β-D-葡萄糖苷(9)，苯甲酰胺(10)，三乙胺盐酸盐(11)，间羟基苯甲酸(12)，methyl 2-β-D-glucopyranosyloxy-6-hydroxybenzoate(13)。