1. 引言
现代玉米育种已经进入到飞速发展阶段，基因工程等技术运用相应地提升了行业的科技创新能力 [1]。近些年来，随着国家关于种子管理的相关法律的落地与实施，科技投入的加大，玉米的生产也呈现出新态势 [2] [3] ，但是无论怎样变化，育种工作在提高玉米产量和质量中占据着不可估量的地位，而近些年干旱气象灾害频发，这对玉米育种工作提出了严峻的挑战。干旱不仅影响玉米的生长发育，也会直接影响到玉米的产量和收获质量 [4] ，据研究标明，玉米因为干旱致中度减产可达10%~25%，最直接的表现是植株的外部形态的变化，而内在生理的反映更多体现在根系吸水能力的强弱方面。选育抗旱性强的玉米品种，不仅是玉米育种中的重要任务，更关系到干旱地区玉米产量的提高和抵御旱灾风险能力的提升 [5] [6] ，对玉米选择适宜的干旱鉴定指标进行抗旱研究，可以鉴别不同品种的抗旱适应性，从而进行不同级别的抗旱性评价，这对玉米产区特别是干旱地区玉米的生产具有现实指导意义 [7] [8]。
玉米不同品种对土壤和大气干旱条件所具有的适应性和抵御能力是不同的，它们在形态结构特征、生理生化特性、生长发育等方面，形成了一系列抗御干旱的机制和对逆境的适应反应，而对玉米萌芽期抗旱性的鉴定方法和指标的研究仅有零星的报道 [9] [10] [11]。Bouslama [12] 等根据种子在高渗溶液或在不同渗透势的土壤中的发芽势和发芽率来评价萌发期的抗旱性，并提出了用种子萌发抗旱指数来反映种子在高渗溶液中的发芽势和发芽率，认为种子萌发抗旱指数是评价种子萌芽期抗旱性的可靠指标。大量研究结果也表明，用高渗溶液进行干旱模拟可代替土壤水分胁迫处理获得比较可靠的结果。发芽率、发芽势、渗透胁迫下的幼苗、根长和干重的伤害率及贮藏物质运转率均与萌发抗旱指数有较强的相关性 [13] [14]。本试验以4个杂交种为测试对象，研究4个PEG-6000水溶液浓度(4%、6%、7.5%、8.75%)胁迫下玉米幼苗期的发芽率、萌发性状的变化，采用萌发抗旱指数来评价玉米品种的抗旱性，比较出抗旱性较强的玉米品种，为当地选育抗旱品种提供借鉴。
2. 材料与方法
2.1. 试验材料
以4个玉米杂交种为试验材料，各品种名称及本试验代码见表1。
2.2. 试验方法
每个品种选取大小均匀，籽粒饱满的种子各500粒，用75%的酒精消毒10分钟，再用蒸馏水冲洗3次。在准备好的长20 cm、宽10 cm发芽盒中铺上一定质量的细沙，按照处理分别倒入配置好的浓度分别为4%、6%、7.5%和8.75%的PEG-6000水溶液，之后按照一定间距均匀将玉米种子摆放在发芽盒中，每个处理50粒，3次重复，以蒸馏水作为对照，共计200粒种子。并将发芽盒置于SPX-250B-G型光照培养箱中，昼/夜温度为26℃/25℃。采用早晚喷水的方法控制湿度在60%~70%，设定好数值，将光照时间调至白天/夜晚为12 h/12 h，光照强度为2500 lux，连续培养10 d。
2.3. 测定项目及方法
2.3.1. 种子发芽及活力测定
发芽率：在第2、4、6、8天调查发芽数，计算发芽率。
发芽势：G4/Gn × 100% (G4为第6天发芽种子数，Gn为供试种子数) [15]。
萌发指数 = 1.00 × nd2 + 0.75 × nd4 + 0.5 × nd6 + 0.25 × nd8 (nd2、nd4、nd6、nd8分别表示第2、4、6、8天的种子发芽率)。
种子萌发抗旱指数 = 水分胁迫下种子萌发指数/对照种子萌发指数。
发芽指数(GI) = ∑Gt/Dt (Gt：发芽开始后第t天的发芽数；Dt：相对应的发芽天数) [16]。
活力指数(VI) = GI × S (S：平均根长 (cm)) [16]。
2.3.2. 生长指标
待生长到3叶1心时开始测定如下生长指标：根系长度、根系条数、幼苗高度；幼苗鲜重和根鲜重，测定方法，用吸水纸吸取植株表面水分，用电子天平分别测定 [17]。
2.3.3. 数据分析方法
实验数据采用wps2019作图、表整理，采用SPSS18.0进行统计分析。
3. 结果与分析
由表2可知，所有试验品种在干旱胁迫下的发芽率都有一致表现，随着PEG-6000水溶液浓度的增加，发芽率降低，下降的趋势在不同品种之间的差异较大，从第八天的表现来看，高低浓度之间发芽率差异最大的是TN4，介于0.87~0.10之间，其它的品种在第八天发芽率的差异由大到小依次为TN1、NT2和TN3。从天数来看，随着天数的延长，NT2、TN1、TN4三个品种4%、6%浓度下的发育率成升高态势，而TN则表现为下降；而随着浓度进一步升高，4个品种的发芽率随着天数增加而下降，尤其在8.75%浓度下下降最多。综合天数和浓度分析，NT2、TN1、TN4在第8天、4%浓度下的发芽率最高，TN3在第6天、4%浓度下的发芽率最高。
Table 2. The germination rate of corn seed treated with peg-6000 solution of different concentration
表2. 不同浓度PEG-6000水溶液处理下的玉米种子发芽率的变化
由表3可以看出各个品种的活力指标在不同浓度PEG水溶液下的变化，表4反映了不同品种间活力指标的差异。总体来说，随着PGE水溶液浓度下降，所有品种的发芽势、发芽指数、活力指数都呈现出下降趋势。分别来看，TN1在4%浓度下的发芽势最高，其次为NT2、TN3和TN4，随着溶液浓度升高，在8.75%浓度下TN4的发芽势近乎为零，TN1与其它品种相比发芽势差异极显著(p < 0.01)，不同浓度之间差异极显著(p < 0.01)。TN3在4%浓度下的发芽指数高于TN4和TN1，明显高于NT2。随着浓度下降，TN3的发芽指数下降较为平缓，在8.75%浓度下NT2的发芽指数数值最小，达到1.66，TN3的发芽指数与其他品种相比差异极显著(p < 0.01)，4%浓度的发芽指数和其它浓度的相比差异极显著(p < 0.01)。TN4在4%浓度下的活力指数最高，为153.45，在8.75%浓度下NT2的活力指数为20.10，数值最小，TN4的活力指数与其他品种相比差异极显著(p < 0.01)，不同浓度之间差异极显著(p < 0.01)。
Table 3. Changes of corn seed vigor index under different concentration peg-6000 aqueous solution treatment
表3. 不同浓度PEG-6000水溶液处理下的玉米种子活力指标的变化
注：品种内同列不同小写字母表示差异显著(P < 0.05)，大写字母表示差异极显著(P < 0.01)。
Table 4. Analysis on the difference of maize seed vigor index among different varieties
表4. 不同品种间玉米种子活力指标差异性分析
注：同列不同小写字母表示差异显著(P < 0.05)，大写字母表示差异极显著(P < 0.01)。
由表5可以看出，随着PEG-6000水溶液浓度的升高，4个品种的抗旱指数均下降，并且在4%浓度下的抗旱指数最大，8.75%浓度下达到最小，从品种来看，TN4在4%浓度下的抗旱指数为0.75，而在8.75%的时候则达到0.09，在所有品种中下降的幅度最大，达到88.00%；下降最小的当属TN3，达到49.02%。4个品种在6%和7.5%两个浓度下的萌发抗旱指数表现近乎一致，减小的速度较为缓慢，但不同品种之间差异也较为明显。上述两种浓度下萌发抗旱指数差异最小的为TN3、TN4，其次为NT2、TN1。
随着PEG-6000水溶液浓度的升高，4个品种的根系长度、根系条数、幼苗高度、根系鲜重、幼苗鲜重等5个待测指标都呈现出不同程度的下降。仅从最大和最小两个浓度来比较就可以看出，NT2、TN1、TN4的根系长度随着渗透液的浓度升高，下降的幅度要大于TN3；4个品种的根系条数都在4%的浓度达到最大；在不同水溶液浓度下，TN1、TN3的幼苗高于另外两个品种，TN4的幼苗高度在6%~8.75%的浓度下下降幅度最小；从植株的鲜重来看，同一个品种的根系鲜重、幼苗鲜重的变化相同，随着浓度的下降而下降，TN3的根系鲜重、TN4的幼苗鲜重随着浓度的下降而缓慢下降。
Table 5. Changes of germination characters of jade seeds treated with peg-6000 at different concentrations
表5. 不同浓度PEG-6000处理下的玉种子萌发性状的变化
注：品种内同列不同小写字母表示差异显著(P < 0.05)，大写字母表示差异极显著(P < 0.01)。
表6显示出不同浓度PEG-6000水溶液处理下4个品种之间的萌发性状差异，可以看出，NT2、TN4的根系长度与TN3相比差异极显著(p < 0.01)；TN4的根系条数和其它品种相比差异显著(p < 0.05)；TN1、TN3的幼苗高度和NT2相比差异极显著(p < 0.01)；NT2、TN1的根系鲜重和TN3相比差异极显著(p < 0.01)；TN3在幼苗鲜重上的表现与其它品种之间差异极显著(p < 0.01)；从萌发抗旱指数的差异分析来看，TN1同TN3、TN4相比差异极显著(p < 0.01)。
Table 6. Germination characters of different peg-6000 solutions were different
表6. 不同浓度PEG-6000水溶液处理下品种间的萌发性状差异
注：同列不同小写字母表示差异显著(P < 0.05)，大写字母表示差异极显著(P < 0.01)。
4. 结论与讨论
很多研究人员发现，在玉米遭受干旱胁迫条件下，能科学地对其抗旱性指标进行鉴定，并采取相应的方法来进行评价，在筛选玉米新品种特别是对选育抗旱性品种具有重要的现实意义。对于大多数植物来说，在自然条件下，种子萌发期受到水分胁迫，会使植物体内循环、代谢受到影响，更严重的会抑制植物生长并致死。PEG-6000模拟干旱胁迫，是通过降低植物生长环境中的水势，从而对植物生长产生影响 [5]。袁志伟 [18] 等研究发现，采用形态和萌发指标来鉴定作物的抗旱性是较为有效的，在作物种子萌发时可以采用抗旱指数来进行评价。
本研究表明，随着PEG-6000水溶液浓度的升高，4个品种根系长度、根系条数、幼苗高度、根系鲜重、幼苗鲜重、发芽势、发芽指数、活力指数呈现出不同程度的下降，使用此浓度梯度来检验玉米种子在干旱条件下的萌发是可行的。从上述性状指标的表现来看，干旱抑制了玉米的萌发，从不同品种来看，TN4的定根系长度、根系条数的数值高于其它两个品种，并且在干旱胁迫下数值下降较小。TN3的幼苗高度优于其它品种，TN3的根系鲜重随着干旱胁迫的加强，下降幅度缓慢，NT2在各浓度下的数值大于其它品种。NT2和TN4两个品种的幼苗鲜重随着干旱程度的加剧，数值相差较小，在不同浓度梯度下的数值差别较小。可见，利用抗旱剂对玉米种子进行处理，有效提高了种子萌发及苗期抗旱能力，可改善干旱胁迫下玉米幼苗生长状况，从而筛选出抗旱能力较强的玉米品种，这与王学智，石汝杰，王军辉等人 [19] [20] [21] 的研究一致。从活力指标方面来看，TN1与NT2、TN3和TN4相比，发芽势在4%浓度下达到最大值。NT2的发芽指数在8.75%浓度下数值最小。TN4在活力指数在4%浓度下最高。综合分析抗旱性状来看，TN1的幼苗期间萌发的抗旱性要优于NT2、TN3和TN4，品种的萌发性状、活力指标表现同抗旱指数差异性表现一致，在试验范围内可以作为评价鉴定玉米萌发期的抗旱性，由此可以为选出抗旱性强的品种提供依据。
玉米生产中，苗期是实现苗全、苗齐、苗壮的关键时期 [22]。玉米种子萌发期抗旱性评价是节水农业研究中的热点问题之一。通过简便、快速而准确的萌发期抗旱性鉴定分析方法，筛选出萌发期抗旱性强的品种，对指导生产品种布局具有重要参考和指导意义。鉴于本试验仅从玉米苗期宏观生长状态下进行调查研究，为了更深入地探究待测品种的抗旱机理，今后可结合玉米体内渗透调节物质的变化及蛋白质编码基因的诱导，不断地改进玉米抗旱性鉴定指标及评价方法，使之更能准确、高效地反映玉米在干旱条件下的生长状态及内部生理变化，为玉米抗旱育种的研究提供支持。
基金项目
北京农业职业学院科技研发推广类项目；电泳技术在鉴定糯玉米品种及纯度上的应用(编号：XY-YF-18-12)。
NOTES
*通讯作者。